副甲状腺ホンモンに係わるレセプタ-代謝機構の研究

1989 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 62480344
• 研究機関: 近畿大学
• 研究代表者: 郡 健二郎 近畿大学, 医学部, 講師 (30122047)
• 研究分担者: 高田 昌彦 近畿大学, 医学部, 助手 ; 加藤 良成 近畿大学, 医学部, 助手
• キーワード: 上皮小体機能亢進症 / 上皮小体ホルモン / 免疫組織化学 / フロ-サイトメトリ- / 細胞周期

研究概要

上皮小体機能亢進症における上皮小体組織の微細構造は、さまざまな型があり、下皮小体機能やcell cycleとの関連が示唆される。そこで、上皮小体ホルモン(PTH)の局在証明について、酵素抗体法を用いて免疫組織化学的に検討を加えた。手術によって摘出した上皮小体を対象とし、IBL製イムノヒストPAPキットを用い、電顕用標本の作成にはPre-embedding法を用いた。光顕標本は下記の4つのタイプに分類された。(1)核および細胞質が染まるもの(2)腺構造の内側の細胞が染まるもの(3)あまり染まらないもの(4)大きな細胞の細胞質のみが濃く、均一に染まるもの。電顕標本では、分泌顆粒だけが黒く染まった。PTHはまずribosomeでmRNAとして合成され、粗面小胞体(RER)に入り、proPTHとなり、ゴルジ装置に移送され、PTHを含む分泌顆粒になり、細胞外に出るか、lysosomeに取り込まれる。我々の検討では上皮小体機能亢進症ではRERおよびゴルジ装置の発達が著明であったが、これらは抗PTH抗体には染まらず、分泌顆粒になった時点で反応することがわかった。また2ーcolor flowcypmetryを用いて上皮小体細胞の細胞周期を調べた。摘出された上皮小体細胞を約1週間培養し、Bromodeoxy uridine(BrdU)を添加、HClに2DNA変性処理後、fluorescein isothiocyanate(FTTC)標識抗BrdU抗体を加え、propidium iodideを加えてflaucytometryに2解析を行なった。上皮小体機能亢進症では、原発性、続発性を問わずGo_1期、G_2^+M期の細胞は多くみられたものの、S期の細胞はほとんどみられなかった。さらにcell sortingにより Go_1期、G_2^+M期の細胞群を個別に抽出し、電顕に2観察したが、RER、ゴルジ装置の発達は認められたものの、両群間に明らかな差はみられなかった。

研究成果

• [文献書誌] Kenjiro Kohri et al.: "Parathyroid hormone and electrolytes during long term treatment with allopurinol and thiazide" Br.J.Urol.59. 503-507 (1987)
• [文献書誌] Kenjiro.Kohri et al.: "Amino acids in urine and plasma of urolithiasis patients" Int.Urol.Nephrol.21. 9-16 (1989)
• [文献書誌] Mitumasa Kodama et al: "Parathyroid carcinoma in a case of chronic renal failure on dialysis" Urol.Int.44. 110-112 (1989)
• [文献書誌] Kenjiro Kohri et al.: "The effect of glycosaminoglycans on the crystallisation of calcium oxalate" Br.J.Urol.63. 584-590 (1989)
• [文献書誌] Kenjiro Kohri et al.: "Calcium oxalate crystal formation in patients with hyperparathyroidism and hyperthyroidism and related metabolic disturbances" Bone and Mineral. 8. 59-67 (1990)
• [文献書誌] Kenjiro Kohri et al.: "Immunofluorescent study on interaction between collagen and calcium oxalate crystals in the renal tubules" J.Urol.
• [文献書誌] Kiyonori Kataoka et al.: "Urolithiasis"Calcium-oxalate crystal formation in urolithiasis"" Plenum Publishing Corporation, 3 (1989)
• [文献書誌] Kenjiro Kohri et al.: "Urolithiasis"The effect of glutamic acid and aspartic acid on calcium-containing stones"" Plenum Publishing Corporation, 3 (1989)