マメ科根粒菌の細胞融合による寄生特性の拡大に関する研究

1988 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 62560271
• 研究種目: 一般研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 畜産学
• 研究機関: 宮崎大学
• 研究代表者: 池田 一 宮崎大学, 農学部, 教授 (20038194)
• 研究分担者: 小山田 正幸 宮崎大学, 農学部, 助手 (60112413) ; 藤井 昇 宮崎大学, 農学部, 助教授 (40040836)
• 研究期間 (年度): 1987 – 1988
• キーワード: 根粒菌 / アルファルファ / ヤハズソウ / 耐酸性 / スフェロプラスト / 細胞融合

研究概要

耐酸性の強いアルファルファ根粒菌の作出を目的として,アルファルファ根粒菌とヤハズソウ根粒菌の細胞融合を試みた。
得られた結果の概要は以下のとおりである。
1)アルファルファ根粒菌とヤハズソウ根粒菌をpHの異なるYM寒天培地(pH4.0〜pH8.0)で培養した結果、ヤハズソウ根粒菌は培地のpHが4.0以上で増殖するのに対し、アルファルファ根粒菌はpH5.0以上の培地で増殖した。
2)アルファルファ根粒菌とヤハズソウ根粒菌のスフェロプラストの調製法について検討した結果、アルファルファ根粒菌はリゾチーム濃度200mg/lで2時間の処理を行うことによりスフェロプラスト化した。これに対してヤハズソウ根粒菌のスフェロプラスト化にはリゾチーム濃度400mg/lで2時間の処理を要した。
3)アルファルファ根粒菌とヤハズソウ根粒菌のスフェロプラストを分子量6000の40%(W/V)ポリエチレングリコールで融合処理した後、200units/mlのペニシリンを用いて融合菌の分離を行った。その結果、ペニシリン6時間処理1回と3時間処理1回の操作で分離した根粒菌はpH4.0のYM培地で増殖し、かつアルファルファの根に根粒を形成した。