| 研究課題/領域番号 |
62570176
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
寄生虫学
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| 研究機関 | 香川医科大学 |
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研究代表者 |
村主 節雄 香川医科大学, 医学部, 助教授 (00032897)
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| 研究分担者 |
原田 正和 香川医大学, 医学部, 助手 (90127580)
佐藤 忠文 香川医科大学, 医学部, 助教授 (20032815)
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| 研究期間 (年度) |
1987 – 1988
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| キーワード | ヒューマンブラッドインデックス / 蚊 / DNAプルーブ / ドットブロット / ハイブリダイゼーション / ビオチン標識 |
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| 研究概要 |
吸血性昆虫の代表として蚊を用いて、その抱血されている血液についての由来動物種の判明のために、核酸を利用する方法を試みた。具体的にはKpnー1 familyのプルーブを用い、フィールドでの採集蚊を対象とした場合に利用でき得る、ドットブロットハイブリダイゼーション法およびビオチン・アビジン標識法の組み合わせについて検討した。
今回の課題研究により判明した事項は以下の如くである。
1.血液サンプルを識別するにニトロセルロース膜を用いたドットブロット法が可能であった。
2.また、放射性標識の代わりにビオチン標識を用いることが可能であった。
3.ひと血液より分離したDNAの検知可能最小濃度は数ng/μlであった。
4.血液においてヒトとサル間の識別は現在不可能であったが、イヌ、ウシ、ブタ、ラット、ヒツジとは識別可能であった。
5.吸血蚊1匹より抽出できた血液由来のDNA量は1.2〜4.6μgであった。
6.吸血蚊においてもヒト由来のものは陽性、ウシ由来のものは陰性であり、本法の応用が可能であった。
7.吸血乾燥蚊においても同様の結果であった。
また、今後の展開については以下の如くである。
1.更にサルとの弁別が可能になるべく他のプローブについても検討する
2.ハイブリダイゼーイョン時の温度などの反応条件についても改良の検討をおこなう。
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