| 研究概要 |
【はじめに】VitaminE(VE)は経験的に妊娠維持に必要な物質とわかっているが, その理由は明らかにされていない. VEの妊娠維持メカニズム解明のために, 我々は生殖器官中のVE濃度, VE取り込みをヒトというヒトについて検討して来た. その結果, 卵巣特に顆粒膜細胞にVEが多く存在していることを見い出した. そこで, 排卵后黄体形成をしている卵巣でVEはStervidもしくはProstaglandin(PG)産生に関与するという仮説をたて, それを証明するために本研究を施行することにした. つまり顆粒膜細胞のStervid, PG産生にVEがどの程度関与するか調べることが本研究の目的である. 本研究は3年間に渡り行こなわれるものであり, この報告は初年度実績概要である. 従って基礎的検討を初年度目標として, 顆粒膜細胞のVE及びCholesterol(Cho1)消費量を測定することにした. Cho1測定をした理由はCho1がSteroidの基質となるからである.
【方法】IVF-ET治療に伴なう採卵手術時に得られたヒト顆粒膜細胞(10^5cell/Flask)を10%Fetal Barine Serum含有Hanis F10培養液で培養し培養開始后24時間目に培養液の交換をした. 培養液交換后48時間目に培養液を採取し, 48時間における培養液中のVE及びChol消費量を測定した. なお, VE及びCholの測定は, Kaydenの方法を改変した抽出法を行こなった后, 可世木の方法でHPLCにて定量した.
【結果】Flask内1.5mlの培養液中VE及びChol量は培養前には各々19.9ng, 及び8.25μgであった. (n=4平均値)48時間に渡る培養の后, VE及びCholは各々8.04μg, 3.74μgに減少した(n=4平均値). 培養48時間におけるVE, Cholの減少率は各々60%と50%であった. つまり, 排卵后のSteroid産生盛んな顆粒膜細胞は48時間に培養液の60%のVEと55%のCholを取り込むことが判明した. 顆粒膜細胞はSteroid基質のCholと同時にVEも多量に取り込む. このVEが, Steroid産生に直接関与するか否かは今后の課題となろう.
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