昨年度、センダイウイルス(HVJ)Mol株の表面抗原遺伝子(F及びHN遺伝子)のクローニングを行い、それぞれの遺伝子が誘導的に発現すると考えられるメタルチオネインプロモーターを持つプラスミドを構築した。さらに、これらのプラスミドをマウス受精卵に導入してトランスジェニックマウスも得た。しかしながら、解析したトランスジェニックマウスの種々の臓器において、FまたはHN遺伝子の発現は認められなかった。 そこで今年度は、F及びHN遺伝子をハウスキーピング遺伝子のプロモーターの支配下に置き、発生、分化の時期や臓器に依存しないで常に発現するようなプラスミドを構築した。今回、ヒトβ-アクチン遺伝子のプロモーターを用いたが、このプロモーターはトランスジェニックマウスにおいても恒常的に働くことがすでに報告されている。F及びHNタンパクのみならず、アンチセンスmRNAが産生されるように、F及びHN遺伝子をプロモーターに対してアンチセンス方向につないだプラスミドも構築した。すなわち、2種類の遺伝子、2種類の向き、計4種類のプラスミドを構築した。 現在までに、9匹(4種類)のトランスジェニックマウスを得ており、今後F及びHN遺伝子の発現について解析する予定である。
|