細胞周期調節に働く癌遺伝子および関連遺伝子に関する研究

1988 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 63010018
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 花岡 文雄 東京大学, 薬学部, 助教授 (50012670)
• 研究分担者: 井出 利憲 広島大学, 医学部, 教授 (60012746) ; 関水 和久 東京大学, 薬学部, 助教授 (90126095) ; 野瀬 清 東京大学, 医科研, 助教授 (70012747) ; 田矢 洋一 国立がんセンター, 研・生物部, 主任研究官 (60133641) ; 西島 正弘 国立予研, 化学部, 室長 (60072956)
• キーワード: 細胞周期 / 温度感受性変異株 / イノシトール輸送 / コフィリン / ホルボールエステル / N-myc蛋白質 / DnaA蛋白質 / DNA複製起点

研究概要

研究代表者および8名の研究分担者の本年度の研究実績は次の通りである。
〔花岡〕酵母においてG1期からS期への移行に必須な遺伝子(GST1)に対するヒト相同遺伝子を、KB細胞cDNAライブラリーから単離し、GTP結合蛋白質のコンセンサス配列を有することを示した。〔井出〕GO/G1期変異株のひとつであるtsJT16株を解析し、許容温度で合成され、制限温度では合成されない蛋白質を1つだけ見出した。〔西島〕CHO-K1細胞からレブリカ法により、イノシトール輸送欠損株を分離した。そのうちの1株は、Na^+依存性のイノシトール取り込み活性を欠損していた。〔松本〕マウスコフィリンcDNAを新たに単離し、ブタのものと比較したところ、同じく166アミノ酸からなり、2アミノ酸残基に置換があるのみという。よい依存性を示した。〔野瀬〕TPAによりc-fosが強力に誘導されるマウス骨芽細胞株から、TPAで誘導されるcDNAクローンを8個分離した。うち3個はメタロチオネインII、1個はオステオポンチン、他の4個は互いに独立の未知の遺伝子であった。〔田矢〕N-myc蛋白質のC末端近傍にあるロイシン、ジッパー構造の、トランスフォーミング能における重要性を部位独異的突然変異により実験的に証明した。〔関口〕G1期に変異をもつハムスター温度感受性変異株tsBN462の変異,を相補するヒトの遺伝子cDNA(CCG1)を分離し、遺伝子産物を同定するための抗体を作製した。〔関水〕大腸菌の染色体DNAの複製開始蛋白質であるDnaA蛋白質の抗体を用いて、ウェスタンプロット解析により、出芽酵母およびマウスエールリッヒ腹水癌細胞抽出液中にDnaAと分子量の類似した蛋白質を見出した。〔矢倉〕DNA複製起点配列を分離するためのHeLa細胞へのプラスミドDNA導入法の検討、および複製起点とプロモーター配列がセットになったものを効率よく分離できるベクターの改良を行った。

研究成果

• [文献書誌] M.Saki,;T.Enomoto,;J.Yanagisawa,;F.Hanaoka,;M.Ui.: Biochemistry. 27. 1766-1771 (1988)
• [文献書誌] F.Matsuzaki,;S.Matsumoto,;I.Yahara,;N.Yonezawa,;E.Nishida,;H.Sakai.: J.Biol.Chem.263. 11564-11568 (1988)
• [文献書誌] M.Shibanuma,;T.Kuroki.K.Nose.: Oncogene. 3. 17-21 (1988)
• [文献書誌] K.Sekimizu,;B.Y.-M.Yung;A.Kornberg.: J.Biol.Chem.263. 7136-7140 (1988)
• [文献書誌] T.Sekiguchi,;T.Miyata,;T.Nishimoto.: ENBO J.7. 1683-1688 (1988)
• [文献書誌] H.Nakajima,;M.Ikeda,;N.Tsuchida,;S.Nishimura.;Y.Taya.: Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 86. (1989)
• [文献書誌] 久下理、西島正弘: "組織培養の技術(第二版)" 朝倉書店, 195-199 (1988)
• [文献書誌] 太田邦夫 監、山田正篤、原沢道美、入来正躬、大橋望彦、折茂肇、大野忠夫、花岡文雄 編: "老化指標データブック" 朝倉書店, 1-334 (1988)