家族性大腸ポリポージスにおける発癌機構の解析

1988 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 63010029
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 外村 晶 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 教授 (30013808)
• 研究分担者: 森 武貞 大阪大学, 医学部, 教授 (60028496) ; 笹月 健彦 九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (50014121) ; 宮木 美知子 東京都臨床医学総合研究所, 研究室長 (20085624) ; 池内 達郎 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 助教授 (90041839) ; 岩間 毅夫 東京医科歯科大学, 医学部・ポリポージス腸疾患研究センタ, 助教授 (70114741)
• キーワード: 家族性大腸ポリポージス / 染色体分析 / 対立遺伝子のヘテロ接合型消失 / ポリープ発生関連cDNAクローン / 連鎖分析

研究概要

1)家族性大腸ポリポージス(以下、FPCと略す)患者およびその家系構成員について、腫瘍、ポリープ、末梢血等を採取し、班員に試料配布を行う(岩間、宇都宮)とともにEBVによるリンパ芽球細胞株を樹立し、凍結保存した(池内)。
2)手術時に得た大腸癌5例、ポリープ3例分について短期培養法を確立し、染色体分布を行った。その結果、癌では5番染色体の欠失は認められなかったが、60%に17番染色体の短腕欠失および18番と22番染色体の欠失が特徴的であった。一方、ポリープについては1個ずつ別々に培養したものとまとめて培養したものとの2種類があり、前者では7番染色体のトリソミー、後者では13番染色体のトリソミーが高頻度にみられた。なお、1例の患者では、ポリープと癌の両者に7番染色体のトリソミーが発見され、癌化機構の1つとの関連性が示唆された(外村、池内)。
3)ヌードマウス可移植性腫瘍株を作製し、正常細胞やポリープとの比較下で、腫瘍における5p、17p、および22gの多型性DNAプローブによるヘテロ接合型の消失について検索を進め、染色体分析の結果と一致して、17pおよび18gの消失が高頻度に認められることを確実にした(宮木、森)。
4)ポリープ発生に関連したcDNAクローンの探索を試み、正常粘膜にくらべポリーププローブとより強く結合するクローンが数個得られた。そのうちの1つはcDNAとして約1.6K6pが入っており、塩基配列はチトクローム酸化酵素IのN末端側の塩基配列と完全に一致した。この酵素との相同性とポリープ発生との関係について検討中である(湯浅)。
5)5番染色体短腕上のマーカーを用いて連鎖分析を行ったところ、D5S71、D5S6、D5S1で最大ロッド値が正の値を示した。しかし、統計学的に有意でなかったので、さらに家系を集積して検定を行う(笹月)。

研究成果

• [文献書誌] Okamoto,M.;Sasaki,M.;Sugio,K.;Sato,C;Iwama,T.;Ikeuchi.;Tonomura,A.;Sasazuki,T.;Miyaki,M.: Nature. 331. 273-277 (1988)
• [文献書誌] Sugio,K.;Kurata,S.;Sasaki,M.;Soejima,M.;Sasazuki,T.: Cancer Research. 48. 4855-4861 (1988)
• [文献書誌] Monden,T.;Morimoto,H.;Mori,T.: Acta Histochem.Cytochem.21. 210-209 (1988)
• [文献書誌] Miyaki,M.;Akamatsu,N.;Sato,C.;Utsunomiya,J.: Mutation Research. 199. 399-414 (1988)
• [文献書誌] Sato,C.;Miyaki,M.;Oikawa,S.;Nakazato,H.;Kosaki,G.: Jpn.J.Cancer Res.(Gann). 79. 433-437 (1988)
• [文献書誌] Utsunomiya,J.: "Gentics of Human Tumors in Japan Pathology and genetic aspects of adenomatosis coli in Japan" Japan Scientific Societies Press Gann Monograph 35, 45-62 (1988)