遺伝子レベルにおける新しい癌化学療法の開発

1988 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 63015009
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 涌井 昭 東北大学, 抗酸菌病研究所臨床癌化学療法, 教授 (20006076)
• 研究分担者: 大槻 健蔵 北里大学, 衛生学部生物科学, 助教授 (60124559) ; 西平 哲郎 東北大学, 医学部外科学, 講師 (50101142) ; 金丸 龍之介 東北大学, 抗酸菌病研究所臨床癌化学療法, 助手 (70152783)
• キーワード: 多剤耐性遺伝子(mar) / mar cDNAプラスミド / クロマチン非ヒストン蛋白 / 98KD蛋白 / erb-B2 / hst

研究概要

今年度の研究実績は次の如くである。1.多剤耐性遺伝子(mar)がヒト癌細胞に実際どの程度発現しているかをみるために、ヒト骨髄性白血病細胞株K562のADR耐性株K562/ADRより得たmar cDNAをプローブとして、食道癌28例、胃癌24例の手術材料および小児急性リンパ性白血病株化細胞3株について、mar mRNAの発現をNothern blot hybridizationで検討した。その結果、食道癌例では2例(2/28)に、小児白血病細胞では3株中1株に有意なmRNAの発現がみられたが、胃癌例ではすべての例でmRNAの発現を認め得なかった。現在このmdr発現の機序を知る目的で、胎生13日目より出生時(22〜23日目)までのラット胎児、2-AAF(acetylamino fluoren)およびDEN(diethylnitrosamine)を投与したラットの胎児の全細胞より得たホモジェネートを用いて、mar mRNAの発現について検索中である。2.mar cDNAプラスミド導入によりADRやVCRに耐性となったNIH_3T_3細胞について、クロマチン非ヒストン蛋白のリン酸化を検討した結果、分子量98KD蛋白のリン酸化が著しく亢進しているのを認めた。この蛋白はマウスエールリッヒ腹水癌細胞より精製した98KD蛋白と同じものであり、1)casein kinase IIの特異基質であること、2)DNA結合蛋白の1種で、80%が核内に存在すること、3)DNAポリメレース活性を上昇させることが明らかにされ、現在、marとの関係を検討中である。3.食道癌手術標本でEGFRおよびerb-B2遺伝子の増巾を検討した結果、1例にerb-B2の増巾がみられ、さらにこの例においてhstの増巾も認められ、両者に共通するgenetic eventの存在を予想させた。これらの知見は遺伝子レベルにおいて、癌細胞の抗癌剤耐性克服の方策を研究する上で、貴重な情報を与へるものと考えられた。

研究成果

• [文献書誌] Kanamaru,R.;Ishioka,C.;Wakui,A.,et al.: Science Reports of the Research Institutes Tohoku Univercity Series C.35. 16-25 (1988)
• [文献書誌] Kenzo,Ohtsuki;Nakao,Ishida.: Biochem.Biophysic.Res.Commun.157. 597-604 (1988)
• [文献書誌] Tsuneaki,Koike;Kenzo,Ohtsuki.: J.Biochem.103. 928-937 (1988)
• [文献書誌] Kenzo,Ohtsuki;Shin-ichiro,Kanno.: Annual Meeting of Interferon Res.(1988)
• [文献書誌] Tsuda,T.;Nakatani,H.; Nishihira,T.,et al.: Jap.J.Cancer Res.(Gann). 79. 534-538 (1988)
• [文献書誌] Ishikawa,A.;Kanamaru,R.;Wakui,A.,et al.: Tohoku J.exp.Med.(1989)