1991 年度実績報告書

カルパイン及びカルパスタチン遺伝子発現検査技術の開発とその病因病態解析への応用

研究課題

研究課題/領域番号	63440083
研究機関	京都大学
研究代表者	野阪哲哉京都大学, ウィルス研究所, 助手 (30218309)
研究分担者	上田國寛京都大学, 医学部, 助教授 (00027070) 畑中正一京都大学, ウィルス研究所, 教授 (30142300) 牧正敏京都大学, ウィルス研究所, 助教授 (40183610) 安達喜文京都大学, 医学部, 助手 (50201893) 村地孝京都大学, 医学部, 教授 (10089104)
キーワード	カルパイン / カルパスタチン / プロテア-ゼ / インヒビタ- / HTLVーI
研究概要	我々はヒト型のカルパインI、IIびカルパスタチン遺伝子を単離し、各遺伝子に対する特異的cDNAプロ-ブを作成した。また、遺伝子構造と機能の関係を詳細に研究し、カルパインI、IIの大サブユニット及びカルパスタチンの機能ドメインに特徴的なアミノ酸配列部位を化学合成し、これらのオリゴペプチドを抗原として、それぞれに対する特異的モノクロ-ナル抗体を得た。これらの抗体を用い、各組織及び疾患におけるカルパインーカルパスタチンの分布、変動を探るサンドイッチ方式のELISA測定系を確立した。HTLVーI(成人T細胞性白血病ウイルス)感染ヒトリンパ球においてカルパインII及びカルパスタチンの遺伝子発現が特異的に上昇することを発見し、これを実験的に証明した。これら主研究に付随して、カルパスタチンは細胞内でリン酸化されるタンパク質であること、カルパインの一部は細胞膜と結合することも明らかにした。更に、機能的なカルパスタチンペプチドを化学合成し、これを培養細胞に導入することで、プロテインキナ-ゼCのダウンレギュレ-ションにカルパインが関与することを見出した。今後は、カルパインカルパスタチン遺伝子転写制御領域の解析、各種疾患における病態との関連性の追求、更にはカルパインーカルパスタチン系の生理的意義の検索が重要な課題である。

研究成果
(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Maki,M.et al.: "Analysis of structureーfunction relationship of pig calpastatin by expression of mutated cDNAs in Escherichia coli" J.Biol.Chem.263. 10254-10261 (1988)
[文献書誌] Takano,E.et al.: "Pig heart calpastatin: Identification of repetitive domain structure and anomalous behavior in polyacrylamide gel electrophoresis" Biochemistry. 27. 1964-1972 (1988)
[文献書誌] Maki,M.et al.: "Inhibition of calpain by a synthetic oligopeptide corresponding to an exon of the human calpastatin gene" J.Biol.Chem.264. 18866-18869 (1989)
[文献書誌] Adachi,Y.et al.: "Calpain inhibitors block TPAーdependent downーregulation of protein kinase C" Biomed.Res.11. 313-317 (1990)
[文献書誌] Inazawa,J.et al.: "Assignment of the human ealpastatin・gene(CATS)to chromosome 5 at region q14→q22" Cytogenetics and Cell Genetics. 54. 156-158 (1990)
[文献書誌] Adachi,Y.et al.: "Phosphorylation and subcellular distribution of calpastatin in human hematopoietic system cell" J.Biol.Chem.266. 3968-3972 (1991)
[文献書誌] Adachi,Y.et al.: "The Biology and Medicine of Signal Transduction" Raven Press,New York, (1990)
[文献書誌] Murachi,T.et al.: "Isozymes: Structure,Function,and Use in Biology and Medicine" WileyーLiss, (1990)

1991 年度 実績報告書

カルパイン及びカルパスタチン遺伝子発現検査技術の開発とその病因病態解析への応用

研究代表者

野阪 哲哉 京都大学, ウィルス研究所, 助手 (30218309)

研究成果

[文献書誌] Maki,M.et al.: "Analysis of structureーfunction relationship of pig calpastatin by expression of mutated cDNAs in Escherichia coli" J.Biol.Chem.263. 10254-10261 (1988)

[文献書誌] Takano,E.et al.: "Pig heart calpastatin: Identification of repetitive domain structure and anomalous behavior in polyacrylamide gel electrophoresis" Biochemistry. 27. 1964-1972 (1988)

[文献書誌] Maki,M.et al.: "Inhibition of calpain by a synthetic oligopeptide corresponding to an exon of the human calpastatin gene" J.Biol.Chem.264. 18866-18869 (1989)

[文献書誌] Adachi,Y.et al.: "Calpain inhibitors block TPAーdependent downーregulation of protein kinase C" Biomed.Res.11. 313-317 (1990)

[文献書誌] Inazawa,J.et al.: "Assignment of the human ealpastatin・gene(CATS)to chromosome 5 at region q14→q22" Cytogenetics and Cell Genetics. 54. 156-158 (1990)

[文献書誌] Adachi,Y.et al.: "Phosphorylation and subcellular distribution of calpastatin in human hematopoietic system cell" J.Biol.Chem.266. 3968-3972 (1991)

[文献書誌] Adachi,Y.et al.: "The Biology and Medicine of Signal Transduction" Raven Press,New York, (1990)

[文献書誌] Murachi,T.et al.: "Isozymes: Structure,Function,and Use in Biology and Medicine" WileyーLiss, (1990)

1991 年度実績報告書

野阪哲哉京都大学, ウィルス研究所, 助手 (30218309)