インフルエンザウイルス血球凝集素のレセプタ-結合部位及び細胞レセプタ-の構造解析

1990 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 63480157
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 中島 捷久 東京大学, 医科学研究所, 助教授 (40012778)
• 研究分担者: 信沢 枝里 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (90183904)
• キーワード: インフルエンザウイルスA型 / レセプタ-結合構造 / 部位突然変異

研究概要

インフルエンザウイルス血球凝集素(HA)の異なる抗原型をもつ,H4,H6,H8,H9,H11,H12の7つのHAについてクロ-ニングを行ない,アミノ酸配列を推定した。そして1〜13のサブタイプのHAたんぱく質についてレセプタ-結合部位のアミノ酸の比較と,種々のオリゴ糖を用いてレセプタ-の特異性を検討した所,H3サブタイプで言われている事と他のサブタイプのHAたんぱく質は性質が異なることがわかった。HAたんぱく質上の微細構造をH3サブタイプとH1サブタイプで比較するため,H1HAcDNA上にアミノ酸残基224ー230に対応する塩基の欠損変異を部位突然変異法によって導入し,この変異HAをSV40の後期プロモ-タ-を用いてサル腎細胞で発現させた。H3サブタイプHAたんぱく質ではこのアミノ酸の欠損が自然界から分離されており,H3サブタイプHAではレセプタ-結合構造のうち第2壁はレセプタ-の特異性に関係しているがレセプタ-結合能には影響がないとされていた。しかしH1サブタイプHAではこの欠損たんぱく質は細胞内で合成され細胞表面に突出することが蛍光抗体法によって同定されるが,このたんぱく質はレセプタ-結合能を失なっていることが判明した。レセプタ-特異性はH3サブタイプHA以外には見つかっていない事などから,H3サブタイプHAのレセプタ-結合構造は他のサブタイプとは異なっているのではないかと推定される。X線回析によるHAの3次構造はH3サブタイプHAしか出されていないので他のサブタイプのHAたんぱく質の3次構造の解明が期待される。

研究成果

• [文献書誌] K.Nakajima et al.,: "Evolution of the NS genes of the influenza A viruses I." Virus Genes. 4. 5-13 (1990)
• [文献書誌] K.Nakajima et.al.,: "Evolution of the NS genes of the influenza A viruses II." Virus Genes. 4. 15-26 (1990)
• [文献書誌] M.Kurokawa et al.,: "Inhibitory effect of proteinkinase C inhibitor on the replication of influenza A virus." J.gen.Virol.71. (1990)
• [文献書誌] A.Yamada et al.,: "Epitope changes on the haemagglutinin molecule of recent H1N1 influenza viruses." J.gen.Virol.
• [文献書誌] S.Nakajima et al.,: "Genetic relationship between the HA genes of type A influenza viruses isolated in offーseasons and later epidemic seasons." Epidemiol.Infect.
• [文献書誌] E.Nobusawa et al.,: "Comparison of amino acid sequences among 13 serotypes of hemagglutinin of influenza A viruses and receptor binding properties" Virology.