| 研究概要 |
1.胎児および成熟マウス胸腺細胞により染色体外の環状DNAを精製し、制限酵素によって断片化し、環状DNAライブラリ-をつくると共に、成熟マウス肝臓細胞より染色体ゲノムDNAライブラリ-を用意した。TCRγ鎖遺伝子領域を解析するためにJγ領域のプロ-ブを用いて、環状DNAライブラリ-よりγ鎖由来のクロ-ンを選択し、染色体DNAクロ-ンと比較した。1)胎児胸腺ではJγではJγ1に近いVγ5,Vγ6の再構成した産物がえられるが、成熟胸腺ではJγ1に遠いVγ4,Vγ7の再構成産物がえられる。2)Vγ4の方がVγ7よりも出現頻度が高い。3)成熟胸腺では、Vγ2-Jγ2、Vγ3-Jγ3の遺伝子再構成産物がJγ1の産物より多くなる。4)Vγ2の方が擬遺伝子属するVγ3よりも出現頻度が高い。5)成熟胸腺細胞のVγ/Jγシグナル結合にN塩基の搬入がみられるが、胎児胸腺細胞ではみられない。6)脾臓細胞の環状DNA上のγ鎖シグナル結合は非常に少ない。7)γ鎖遺伝子再構成をN配列の有無とVγの使い分けからみると胎児胸腺と成熟胸腺とではTCRγ鎖を生ずるT細胞の系譜が異ることを示す。
2.TCRδ鎖遺伝子領域についても同様の解析を行った。1)マウスδ鎖遺伝子の欠失に関するシグナル遺伝子として3種類のδRec1、2、3と4Jαを染色体上に固定した。2)4Jαの1kb上流から数10kb下流のCαまで転写し、多様なスプライシングを示す不妊RNA転写物TEA0Cαを固定した。3)TEA-Cαは胎児期胸腺分化途上、δ鎖におくれて発現し、α鎖の出現と共に低下する。4)α鎖遺伝子内に存在するδ鎖遺伝子の再構成開始と共にTEA-Cαも転写され、α鎖のJ領域の染色体構造を解放してδRec/4Jα組換えによっでδ鎖遺伝子を欠失させると共に、ひきつづくα鎖遺伝子再構成を容易にしているものとみられる。今後TEA-Cαの転写を支配し、組換えを活性化する因子の解明がまたれる。
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