リンパ球の増殖分化と細胞内シグナル伝達の分子論理的解析

1988 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 63480171
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 高津聖志 キヨシ 熊本大学, 医学部, 教授 (10107055)
• 研究分担者: 山口 直人 熊本大学, 医学部, 助手 (00166620) ; 富永 明 熊本大学, 医学部, 助教授 (50172193)
• キーワード: Bリンパ球分化因子 / IL-5 / IgA産生 / IL-5レセプター / 初期株化Bリンパ球増殖因子 / 好酸球増殖分化因子 / インターロイキン

研究概要

TRF/IL-5(以下IL-5と略す)はBリンパに球増殖分化因子として単離された。しかしながらIL-5はBリンパ球のみならず未熟Tリンパ球や骨髄の好酸球前駆細胞に作用しそれらの増殖、分化を促進することも判明した。本研究においては、Bリンパ球の増殖分化に関し、IL-5とそのレセプター系を中心に解折した。IL-5遺伝)を導入した細胞を培養し、その上清よりIL-5抗体カラムおよびHPLCシステムを用いIL-5を精製し実験に供した。本年度は(i)Tリンパ球-Bリンパ球の直接接触型抗体産生系においてもIL-5が重要な役割を果していることをIgA産生を中心に明らかにした。(ii)骨髄細胞を試験管内で培養する系にIL-5を添加し、骨髄細胞からのBリンパ球、好酸球、マクロファージなどへの増殖分化に対しIL-5に感受性のstageがあること、IL-5に依存性に増殖する初期株化B細胞の樹立をした。(iii)放射標識精製IL-5を用い、IL-5応答性細胞の膜表面上にはIL-5を特異的に反応するレセプターが存在すること、IL-5のレセプターへの結合は37℃10分間で飽和に達し、細胞内へのレセプターのとり込みはあまりないこと、高親和性及び低親和性の二種類のIL-5レセプターが存在しIL-5シグナルは高親和性レセプターを介し伝達されること、IL-5と結合性を示す蛋白質(分子量約46,000〜50,000)が架橋剤を用いた実験により確認できた。(iv)IL-5によるBリンパ球の増殖はインターフェロン-γや形質変換細胞増殖因子(TGF-β)による阻害を選択的にうけ、Ig産生細胞への分化は免疫抑制剤であるサイクロスポリンAによる選択的阻害をうけることを明らかにした。IL-5レセプターの単離に関しては準備が整ったのみである。今後は抗IL-5レセプター抗体の作製およびCONA単離が必須であり、その方向に研究を進めている。

研究成果

• [文献書誌] Tominaga,A.,et al.: theJournal Immunology. 140. 1175-1181 (1988)
• [文献書誌] Nakaishi,K.,et al: the Journal of Immunology. 140. 1168-1174 (1988)
• [文献書誌] Yamaguchi,Y.,et al.: The Journal of Experimental Medicine. 167. 43-56 (1988)
• [文献書誌] Yamaguchi,Y.,et al.: The Journal of Expeeimental Medicine. 167. 852-855 (1988)
• [文献書誌] Mita,S.,et al.: The Journal of Experimental Medicine. 167. 863-878 (1988)
• [文献書誌] Tominaga,A.,et al.: Growth factors. 1. (1989)