腎内血圧調節ホルモン系の生合成調節並びに細胞性作用機構の研究

1989 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 63480221
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 阿部 圭志 東北大学, 医学部, 教授 (60004777)
• 研究分担者: 竹内 和久 東北大学, 医学部, 医員 ; 尾股 健 東北大学, 医学部, 助手 (50194634) ; 佐藤 牧人 東北大学, 医学部, 助手 (90201532) ; 保嶋 実 東北大学, 医学部, 助教授 (90142934)
• キーワード: 血管平滑筋 / イノシト-ル隣酸 / カルシウム / アンギオランシンII / バソプレッシン / 心房性利尿ペプチド / レ-ザ-顕微鏡

研究概要

1.これまでに確立した細胞内カルシウム測定法を基に心房性ナトリウム利尿ペプチビ(AVP)の血管平滑筋細胞作用機構について検討し結果をまとめた。血管収縮ホルモンのバゾプレッシン(ANP)およびアンギオテンシンII(AII)は血管細胞内カルシウムを一過性に増加させるが、このカルシウム動員をANPは抑制しなかった。しかしANPには細胞内カルシウム濃度の基礎レベルを低下させる作用があること、またAVP、AII投与時に起こる急峻な増加に続くカルシウムレベル(sub tarnd incrase)に対しこれを低下させる作用があることが見いだされた。このことからANPはホルモンによるカルシウム動員機構そのものには影響を与えず、むしろ別な機構(例えばCa-ATP-aseの活性化等)により細胞内カルシウムレベルを低下させ平滑筋弛緩をもたらしている可能性が示唆される。
2.レ-ザ-顕微鏡により細胞内カルシウムインジケ-タ-のfura-2、Indo-1の細胞内分布を調べた。その結果fura-2は平滑筋内に不均一に網状ないし顆粒状に分布している像を見たがIndo-1は比較的均一な分布を示した。
HPLCにて細胞内存在形態を分布したところsoluble fractionに存在するfura-2のすべて加水分解されたfura-2であることがわかった。これはまたfura-2の螢光スペクトラム分析でも確かめられた。またスペクトラム分布では脂溶性分画(細胞膜分画)にfura-2/AMが存在している可能性が示された。このようにfura-2は平滑筋において不均一に取り込まれていることがわかり、この点で単一細胞の実験には注意を要すると考えられた。

研究成果

• [文献書誌] K.ABE: "CLINICAL USEFULNESS OF LOW-DESE CAPTOPRIL ON MILD TO MODERATE ESSENTIAL HYPERTENSION" KININ V,PART A.EDDITED BYK.ABE,H.MORIYA AND S.FUJII PLENUM PUBLISHING CORP.35-38 (1989)
• [文献書誌] 竹内和久,佐藤俊一,阿部圭志,木村正人,吉永馨,稲葉文男: "レ-ザ-光励起螢光顕微鏡による血管平滑筋細胞内Ca局在の検討" 医学のあゆみ. vol.148 no.11. 749-750 (1989)
• [文献書誌] K.Takeuchi,K.Yoshinaga et al: "THE EFFECT OF ATRIAL NATRIURETIC PEPTIDE ON CYTOSOLIC FREE CALCIUM IN VASCULAR SMOOTH MUSCLE CELLS" TOHOKU J.EXP.MED.158. 47-56 (1989)
• [文献書誌] K.Takeuchi,K.Yoshinaga H.Inaba et al.: "INTRACELLULAR COMPARTMENTALIZATION OF fura-2 DYE DEMONSTRATED BY LASER EXCITATION FLUORESCECE MICROSCOPY:A PROBLEM IN MEASURING CYTOSOLIC FREE CALCIUM CONCENTRATION USING fura-2 FLUORESCENE IN VASCULAR SMOOTH MUSCLE CELLS" TOHOKU J.EXP.MED.,. 159. 23-35 (1989)
• [文献書誌] K.Takeuchi,K.yoshinaga et al.: "PHOSPHOINOSHITIDE HYDROLYSISAND CALCIUM MOBILIZATION INDUCED BY ANGIOTENSIN II AND VASOPRESSIN IN CULTURED VASCULAR SMOOTH" KIDNEY INTERNATIONAL.
• [文献書誌] K.Takeuchi,K.Yoshinaga et al.: "BRADYKININ STIMULATE PHOSPHOINOSITIDE HYDROLYSIS IN CULTURED VASCULAR SMOOTH MUSCLE CELLS" BIOSIGNALLING IN CARDIAC AND VASCULAR SYSTEM,PERGAMON PRESS,OXFORD. 335-338 (1989)
• [文献書誌] M.YASUJIMA,K.YOSHINAGA et al.: "ROLE OF THE ENDOGENOUS ANGIOTENSIN II IN THE ANTIHYPERTENSIVE EFFECT OF MK421 IN RATS MADE HYPERTENSIVE BY NOREPINEPHRINE OR VASOPRESSIN" KININ V,PART A.EDDITED BY K.ABE,H.MORIYA AND S.FUJII PLENUM PUBLISHING CORP., 35-38 (1989)
• [文献書誌] M.SATO,K.YOSHINAGA et al.: "INHIBITORY EFFECT OF CICLETANINE ON VASCULAR SMOOTH MUSCLE CELL PROLIFERATION" Arch.Mal.Coeur., 82(IV)63-66 (1989)