| 研究課題/領域番号 |
63480240
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| 研究機関 | 東京慈恵会医科大学 |
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研究代表者 |
赤塚 順一 東京慈恵会医科大学, 小児科, 教授 (20056550)
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| 研究分担者 |
池上 真由美 東京慈恵会医科大学, 小児科, 助手 (40184410)
小林 尚明 東京慈恵会医科大学, 小児科, 助手 (50186756)
内山 浩志 東京慈恵会医科大学, 小児科, 助手 (10168718)
藤沢 康司 東京慈恵会医科大学, 小児科, 助手 (10130197)
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| キーワード | PBIgG / flowcytometry / モノクロナ-ル抗体 / ITP / ELIZA-plaqueassay / エピト-プ |
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| 研究概要 |
PBIgG産生のキネティクスに関する研究
1)PBIgGの血小板への結合に関する研究:ITP患者およびコントロ-ル血清よりprotein A-sepharose CL-4Bによるaffinity chromatographyによりIgG分画を抽出し、これをORh+血小板、さらに正常血清とを37℃、30分incubateし、ついでFITC標識F(ab′)2フラグメント抗体を加えflococyfometryで血小板結合蛋白様式を検討した。その結果、ITP患者血清中の抗血小板IgG抗体にはそれ自身が同種血小板に結合するのみならず、その結合に当り他の血漿蛋白、たとえばIgM、albumineなども非時異的に結合する現象を見出した。このようなPBIgGの性状は、その産生のキネティクスの解明にも有用な知見である。この際、同時に血小板の傷害によると思われるfragmentuticnが同時に産生されることも判明した。
2)PBIgG産生リンパ球の検出:ヒト血小板で感作したマウスの末梢及び脾臓のリンパ球中にPBIgG産生リンパ球を證明するELIZAーplaqueassayを開発したことは、報告した。同法をヒトITPに応用して、PBIgG産生リンパ球の検出を行っているが、なお成功していない。目下、反応系にinterleukinを加える等の工夫を行っている。
3)PBIgGに対するモノクロナ-ル抗体の作成:正常ヒトガンマグロブリンに対するモノクロナ-ル抗体の作成が可能となった。
そこで現在、ITP患者のIgG分画に対するモノクロナ-ル抗体を作成中で、この抗体が特異的にPBIgGのエピト-プを認識するか、否かを検討中で、本年5月の日本小児科学会に発表する予定である。
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