| 研究概要 |
チオ-ル系蛋白分解酵素インヒビタ-(TPI)をヒト肺癌細胞株を用いて分離し、これらの特性を検討した。
1)ヒト肺癌細胞株LKー2(扁平上皮癌)の培養液と培養細胞のそれぞれからゲルろ過法とイオン交換クロマトグラフィ-の2段階でTPIを分離した。培養からは分子量90,000の高分子TPIと分子量10,000低分子TPIが分離され、蛋白分解酵素阻害活性は低分子TPIが主体であった。低分子TPIの活性はpH6からpH10の範囲で安定で、60℃以下では熱に安定であった。また、チオ-ル系蛋白分解酵素を特異的に阻害し、セリン系蛋白分解酵素とコラゲナ-ゼを全く阻害しなかった。
一方、培養細胞からは分子量10,000の低分子TPIのみ分離され、培養液中の低分子TPIとほぼ同じ性質を持っていた。
2)ヒト肺癌細胞株Luciー10(腺癌)でも培養液から分子量90,000の高分子TPIと分子量10,000の低子TPIが分離され、培養細胞からは分子量10,000の低分子TPIのみ分離された。
3)ヒト肺癌細胞株由来の何れのTPIも免疫拡散法で生体の主要なTPIである血中α2ーTPI、尿中UTPIとの間に共通抗原性を認めなかった。
4)培養液中に経時的に蓄積されるTPI活性は、単細胞数当り及び単位時間当りで比較すると、対数増殖期に比べ定常期では2倍から3倍高値であった。
5)LKー2の培養液より分離した低分子TPIは〔^3H〕チミジンの取り込みでみたLKー2の培養液より分離した低分子TPIは〔^3H〕チミジンの取り込みでみたLKー2のDNA合成を濃度依存性に強く抑制した。
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