| 研究概要 |
抗網膜抗体が生体にて産生され,それらが網膜変性症などの病態に関与していることが示唆されている。これらの病態においてその抗原となるものは網膜において特異的に産生される蛋白質である。網膜に特異的に産生される蛋白質としては現在のところロドプシンや網膜S抗原などが知られている。本年度は昨年度と同様,分子生物学的手法を用いてこれらの網膜特異抗原を実際に我々が研究に応用できる形,即ちcDNAとして分離するとともに,実際の網膜疾患患者の遺伝子DNA中の網膜特異抗原遺伝子の解析を行うことを目的として研究を行なった。
第一に既知の網膜特異抗原としてロドプシン,網膜S抗原,トランスデュ-シン(αサブユニット),IRBP,CRALBP,MEKA蛋白質に対するcDNAを選択し,それぞれのcDNAをベクタ-に組み込んだ形で大腸菌JM109に形質導入を行なった。これにより各種網膜疾患患者の遺伝子レベルでの網膜特異抗原の異常の有無を検索することが可能となった。第二に未知の網膜特異抗原の分離を行なう前段階としてヒト網膜由来cDNAライブラリ-を入手し,プロ-ブとしてヒト脳由来メッセンジャ-RNAを鋳型としてcDNAを合成した。これにより将来,未知の網膜特異抗原に対するcDNAのスクリ-ニング及びクロ-ニングを行なう準備が整った。第三に網膜色素変性症患者の遺伝子を解析した結果,常染色体優性遺伝形式を示す網膜色素変性症の一家系二症例にロドプシン遺伝子の点突然変異の存在が確認された。これは本疾患の成立機序におけるロドプシンの先天的遺伝的異常の関与を示唆するものであり,本疾患の病態解明のための大きな知見であった。
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