| 研究概要 |
Tn3トランスポゼースによるin vitro DNA再編成反応系は、既に大量に精製されているトランスポゼースと、やはり既に確立されているDNA欠失反応検出系を用いて試みられた。トランスポゼースのみでは十分な反応は検出されなかったが、宿主染色体にコードされているIHF蛋白を添加してポジティブな結果が得られた。但しin vitro反応とは異なり欠失の端点についての特異性は見られなかった。(M.Morita and Y.Sugino:proceeding of Japan Academy:Series B,65,1ー4,1989)この違いの原因としては、更に他の蛋白因子の必要性や反応条件の違いなどが考えられるが、原因解明の一助として、実際に得られた欠失の端点の塩基配列の決定を行いつつある。精製トランスポゼースを用いたDNA結合実験では、従来用いられたlinear DNAの他に、環状DNAを用いたところ、twistタイプDNAに対して特に強く結合するという興味ある結果を得た(森田・杉野、関西医科大学雑誌41巻、1989)。又モノクローナル抗体を用いてTn3のIRに対する特異的結合と非特異的結合とを弁別することができた。(K.Takeda ＆ Y.Sugino,in preparation)。一方、並行して行われているin vivoでの宿主変異株を用いた実験では、他の系で必要なHU蛋白がTn3による欠失形成には必要ではないことが証明された(M.Morita et al.,Gene,76,359ー362,1989)DNAポリメラーゼIの遺伝子polA変異のTn3の転移に対する影響を調べた結果、この酵素の欠損は何らの影響を及ぼさないことを見いだした。(森田・杉野、関西医科大学教養部紀要 第12号 1989)
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