| 研究課題/領域番号 |
63560104
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| 研究機関 | 岡山大学 |
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研究代表者 |
田中 英彦 岡山大学, 農学部, 教授 (90065912)
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| 研究分担者 |
江崎 信芳 京都大学, 化学研究所, 助教授 (50135597)
稲垣 賢二 岡山大学, 大学院自然科学研究科, 助手 (80184711)
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| キーワード | セレノメタロチオネイン / セレン生化学 / ナンセンスコドンのサプレッション / 重金属解毒作用 / 遺伝子合成 |
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| 研究概要 |
1)昨年度に引き続き、合成したCu-SeMTの構造解析を行った。Cu-SeMTのESRパラメ-タ-はN.CrassaのCu-MTの酸化型のパラメ-タ-に類似していた。銅-硫黄クラス-タ-中の硫黄をセレンに置換してもパラメ-タ-には顕著な変化は観察されなかった。この事実と昨年度の結果から、Cu-SeMTの結合銅イオンのまわりの配位構造はCuMTのそれとよく似ていることが推察された。両複合体はシステインにより完全に還元を受けるが、アスコルビン酸に対する挙動は異なっていた。これはCuーMTよりもCu-SeMTの方が低い酸化還元能を持つことに起因するためと思われる。そこで、その構造を更に詳細に検討するためにEXAFS分析を試みた。銅EXAFSで両複合体を解析した結果、エッシジャンプ付近のX線吸収スペクトルは非常に類似することが認められた。硫化第二銅等の標準試料のデ-タを用いて結合距離を求めた結果、Cu-Se結合に関しては3種類に区別することができた。距離の短いもの、中間のもの、長いものについて、各々の結合数は3、4、2で、又存在比は3:1:3であった。ほぼ同じ結果がセレンEXAFSからも得られ、これらの結果に基ずいて本構造を推定した。
2)遺伝子レベルからSeMTを合成するために、昨年度合成したMT遺伝子の5'末端に最も近い1個のCys残基をコ-ドするTGTをSeCys残基をコ-ドするナンセンスコドンTGAに改変し、pUC18のlacZ'遺伝子中に挿入し、大腸菌中での発現を検討した。その結果、その発現は嫌気条件下でのみ起こることを見いだした。
3)グルタチオンのセレンアナログの4種のジアステレオマ-を合成し、その性質を解析した。得られた生成物はいずれも酸化型ジセレニドであり、260-340nmにジセレニドに由来する幅広い吸収を示した。
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