再生肝における細胞癌遺伝子の逐次的発現に関する研究

1989 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 63570316
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 金子 義保 東京大学, 医学部(病), 助手 (90124669)
• 研究分担者: 浜崎 卓 東京大学, 医学部, 医員 ; 中山 利文 東京大学, 医学部, 医員
• キーワード: 肝再生 / 癌遺伝子 / mRNA / 細胞増殖因子

研究概要

肝部分切除後の再生過程ではc-60sやc-mycなどの細胞癌遺伝子が逐次的かつ一過性に発現される。この機序を分子レベルで解析するためにはin vitroの実験系が有用と思われる。そこでin vivoの癌遺伝子の逐次的発現を再現できる培養細胞を用いた実験系の確立を試みた。ヒト正常肝細胞や肝癌細胞を無血清培地で培養することにより増殖を停止させる。EGFやPDGFで刺激することによりこれらの細胞は再び増殖を開始する。この際にc-fosとc-mycが逐次的かつ一過性に発現され,その経過はin vivoの癌遺伝子の逐次的発現とほぼ同じであることが確認された。従ってin vivoの肝再生過程に於ける癌遺伝子発現をこれらの細胞培養系を用いて研究することが可能であろうと思われた。そこでこの培養細胞を用いてc-fosやc-mycの発現に影響する因子とその作用機序の解析を行った。肝癌細胞におけるc-mycの発現はCキナ-ゼを活性化するフォルボ-ルエステルやテレオシジンで細胞分化を誘導すると減少する。この現象はDNaseI感受性でみた遺伝子の高次構造の変化を伴わない。またトポイソメラ-ゼ阻害剤ノボビオシンはc-mycのDNaseI感受性を減弱させるがc-myc mRNA量の減少は伴わない。このようなデ-タからフォルボ-ルエステルやテレオシジンによるc-myc mRNA量の減少は転写促進因子の減少あるいは何らかの転写抑制因子の誘導による可能性が示唆された。c-fosやc-mycの転写調節に関与するであろう核内DNA結合蛋白を解析するためにこれらの遺伝子の5′側上流の塩基配列を化学合成しゲルシフトアッセイを始めている。

研究成果

• [文献書誌] 岡博: "肝臓病学" 日本医事新報. 3333. 3-10 (1988)
• [文献書誌] 金子義保: "肝癌と癌遺伝子" 内科. 61. 608-611 (1988)
• [文献書誌] 金子義保: "薬剤により誘発される培養ヒト肝細胞の線維芽細胞様細胞への形態変異" 肝臓. 29. 824 (1988)
• [文献書誌] 岡博: "肝臓病学" 日本医事新報. 3381. 21-28 (1989)
• [文献書誌] 金子義保: "Fibroblast-like transformation and c-myc gene alterdtion of human hepatcytes induced by novobiocin and butyrate" Biochem.Biophys.Res.Commun.155. 305-310 (1988)
• [文献書誌] 金子義保: "Alteration of differentiation state of human hepatocytes cultured with novobiocin and butyrate" Cancer Research.
• [文献書誌] 金子義保: "αフェトプロティン,inケ-ススタディ検査値の診断プロセス" 中外医学社, 229 (1989)
• [文献書誌] 金子義保: "肝再生とオンコジ-ンin肝臓" 南江堂, (1990)