フロ-サイトメトリ-を用いた新しい抗癌剤感受性試験の開発を試みた。 現在までの研究で以下のことが明らかになった。1.泌尿器科悪性腫瘍の短期細胞培養は、機械的分散を行いRPMI-1640+10%胎児牛血清を培地として用いることで、比較的容易に行える。ただ、この際、若干の線維芽細胞の混入は避けられない。2.抗癌剤の接触による効果と考えられる移行上皮癌細胞の細胞形態の変化は核の濃縮ないし核の崩壊として24時間以内の比較的早期に認められた。3.抗癌剤の接触により細胞形態に変化の生じた症例では、フロ-サイトメトリ-で測定したDNAヒストグラム上でも変化を認め、その変化は細胞形態の変化より早期に起きていた。4.DNAヒストグラムから定量的に細胞動態の変化を求めようと試みたが、移行上皮癌では1つの腫瘍がDNA ploidyの異なる複数のクロ-ンよりなることが少なくなく、定量的な細胞動態解析ができるものが少ないという結果であった。そこでフロ-サイトメ-タ-を換えて抗BrdU抗体を用いた細胞動態解析を試みたが、まだ、安定した手技の確立を見ていない。5.ルミノフォトメ-タ-を用いたATP量の測定は1×10^4個と少ない数の細胞で可能であり、ATP量は細胞のトリパンブル-によるviability判定とよく相関した。本法は、又、簡便でかつ短時間で行えるという利点を合わせ持っている。当初予定していた2、3の結果に癌細胞のATP量の測定結果も加えて解析し、抗癌剤の接触によって癌細胞が細胞死に至るまでのDNAヒストグラム、細胞動態・細胞形態上の変化過程とそれぞれの関係を明らかにしようという試みは、細胞動態の十分な解析結果が得られずに果たせず、抗癌剤の新しい感受性試験への応用を確立するまでには至らなかった。さらに、細胞動態解析を検討し本研究を完成したい。
|