| 研究課題/領域番号 |
63570788
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| 研究機関 | 佐賀医科大学 |
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研究代表者 |
杉森 甫 佐賀医科大学, 医学部, 教授 (50038642)
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| 研究分担者 |
蜂須賀 徹 佐賀医科大学, 医学部, 助手 (70180891)
岩坂 剛 佐賀医科大学, 医学部, 講師 (60117067)
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| キーワード | 子宮頸癌 / HPV / 癌遺伝子 / フィルタ-ハイブリダイゼ-ション / インサイトハイブリダイゼ-ション |
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| 研究概要 |
1)HPV感染症の有無を簡易に検索しうるFilterhybridizationを行った。細胞診採取のブラシをガラスに塗抹後、小試験内の緩衝液中にて洗い、細胞浮遊液を得る。蛋白分解酵素などを添加して細胞を破壊した後、ナリロユフィルタ-に3/2通させ、DNAを吸着させた。HPVDNAプロ-ベを用いて放射線同位元素によりHPVDNAの有無を検索した。本法によれば陽性例は強く検出されるが、背景の汚染がひどく判定困難な例が多く出現した。細胞液の酵素処理後フェノ-ル・クロロホルム・エタノ-ル処理でDNAを抽出しから行うと汚染が少なくて良いが、過程が煩雑になる欠点があった。この間、virapapというキットが市販され始め、本キットはRNAを使用しており試みたところ汚染が少なくてスクリ-ニングとしては良いことが判明した。但し、HPVの幾つかの型にのみしか検出できない欠点がある。
2)基形成〜上皮内癌症例の組織切片についてinnsitubybridizationを施行した。CINI〜IIIにおけるHPV陽性率は7/12(58%)、5/12(42%)、16/22(73%)であり、型別にみると、6、11型のものは50、17、0%、16型は8、25、55%、18型は0、0、18%であった。すなわち、CINの程度が高くなるにつれて6および11型は減少しているのに対し、16および18型は増加している、とくにCINIIIではすべてが16または18型であった点が注目される。
3)現在、上記方法を症例を増して検討していると共に、同一症例についての癌遺伝子発現についてもrasp21について負症組織学的に検討中である。
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