連鎖球菌細胞の表層抗原に関する研究

1989 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 63570873
• 研究機関: 徳島大学
• 研究代表者: 長宗 秀明 徳島大学, 歯学部, 助手 (40189163)
• 研究分担者: 湊 義博 徳島大学, 保健管理センター, 助教授 (00035768) ; 福井 公明 徳島大学, 歯学部, 教授 (40035407) ; 太田 房雄 徳島大学, 歯学部, 助教授 (90035478)
• キーワード: ミュ-タンス群連鎖球菌 / 単クロ-ン抗体 / 型特異的抗原 / 多糖体抗原 / 抗原決定基 / 菌体表層抗原 / EIA

研究概要

本年はStreptococcus mutans血清型eのLM7株を抗原に用い、血清型eに特異的でE群連鎖球菌と非交差性の単クロ-ン抗体(MAb)の作製を試みたが、以前報告したMAbと同じくこれら2菌種に交差性を示すMAbのみが得られた。またStreptococcus mutans血清型fのSE17株あるいはStreptococcus downei血清型hのMF25株を抗原に用いて各血清型に特異的MAbの作製を試みたが、これも昨年と同じく、血清型fを抗原とした場合はStreptococcus mutans菌種特異的(血清型c、e、f共通)なMAbのみ得られ、血清型hを抗原とした場合はStreptococcus sobrinus血清型d、Streptococcus sobrinus血清型g、Streptococcus downei血清型hに共通なMAbのみが得られた。また各々の抗原決定基についての解析結果からも、前者は多糖抗原上のN-アセチルグルコサミンを、後者は多糖抗原上のラムノ-ス及びβ結合ガラクト-ス構造を認識し、昨年得られたMAbと同一抗原決定基に対する抗体であることが判明した。Streptococcus sobrinus血清型gのOMZ65株を抗原として得られたMAbはミュ-タンス群連鎖球菌中で血清型gのみに特異性を示したが、本血清型標準株の一部とは反応性を示さなかったことから、本血清型には免疫学的特異性の亜型が存在する可能性を見出した。この亜型を決定する抗原については鋭意解析中である。なお本年はこれらのMAbの認識抗原構造の解析過程におき、競合定量沈降反応と競合酵素免疫測定法での解析結果に平行関係を証明し、非沈降性MAbの認識抗原解析に後者が最適であることも示した。さらに、昨年及び本年度得られたMAbを組み合わせた酵素免疫測定法によってミュ-タンス群連鎖球菌臨床分離株の菌種同定を試みた結果、簡便、迅速に、正確で再現性の良好な同定結果を得ることができた。従って本同定法は、疫学調査やう蝕活動度の測定等の臨床分野での応用が有望視される。

研究成果

• [文献書誌] Fusao Ota: "Type-specific antigen of Streptococcus rattus strains(KAY1 and FA1).I.Characterization" Zentralblatt fur Bakteriologie. 271. 36-45 (1989)
• [文献書誌] Fusao Ota: "Type-specific antigen of Streptococcus rattus strains(KAY1,FA1 and BHT).II.Ultrastructural localization" Zentralblatt fur Bakteriologie. 271. 137-145 (1989)
• [文献書誌] Hideaki Nagamune: "Directional immobilization of sodium and potassium activated ATPase to expose its cytoplasmic part to the liquid phase on microtiter plates by wheat germ agglutinin" Analytical Biochemistry. 180. 362-367 (1989)
• [文献書誌] 太田房雄: "モノクロン抗体を用いる連鎖球菌の免疫学的特異性に関する研究 I.EIAプレ-トの選択と多糖抗原の使用条件" 四国医学雑誌. 45. 245-255 (1989)
• [文献書誌] 長宗秀明: "モノクロン抗体を用いる連鎖球菌の免疫学的特異性に関する研究 II連鎖球菌全菌細胞の免疫学的解析に用いるEIAマイクロタイタ-プレ-トの選択" 四国医学雑誌. 45. 256-264 (1989)
• [文献書誌] Fusao Ota: "A comparison of competitive enzyme immunoassay and precipitin inhibition tests in the analysis of polysaccharide antigenic determinants of oral streptococci" Journal of Immunological Methods. 124. 259-266 (1989)
• [文献書誌] Fusao Ota: "Cross-reactive polysaccharide antigens(types a,d,and h)of the mutans group of streptococci:Different molecular forms of the type as distinguishable by monoclonal antibodies" Zentralblatt fur Bakteriologie. (1990)
• [文献書誌] Hideaki Nagamune: "Cri-protein Streptococcus cricetus specific surface glycoprotein antigen"
• [文献書誌] Hideaki Nagamune: "Monoclonal antibodies specific for Streptococcus mutans(types c,e,and f)determinant on the cell wall polysaccharide antigen"
• [文献書誌] Fusao Ota: "Monoclonal antibodies specific for Streptococcus rattus cell wall antigen"
• [文献書誌] 長宗秀明: "「電気泳動法-基礎と実験」第7章 泳動タンパク質の検出" 廣川書店, 420 (1989)