| 研究課題/領域番号 |
63850161
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| 研究種目 |
試験研究
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
戸田 昭三 東京大学, 農学部, 教授 (40011845)
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| 研究分担者 |
渡辺 秀夫 東ソー(株), 科学計測事業部企画開発部, 部長
大久保 明 東京大学, 農学部, 助手 (20111479)
寺前 紀夫 東京大学, 工学部, 講師 (70114569)
清水 高雄 東京大学, 医学部, 助教授 (80127092)
沢田 嗣郎 東京大学, 工学部, 教授 (90011105)
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| キーワード | プロスタグランジン / ロイコトリエン / レ-ザ- / 蛍光検出器 |
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| 研究概要 |
プロスタグランジンおよびロイコトリエン類の超微量分析用のレ-ザ-励起蛍光検出装置の第1次の試作品の製作が完成した。本装置の特色は、小型で内蔵式のアルゴンレ-ザ-と、より高出力の外部設置式Nd:YAGレ-ザ-の両光源を目的に応じて利用できる仕様になっている点である。小型の空冷アルゴンレ-ザ-を内蔵した設計は、将来の臨床応用に対し医療現場での簡便な使用方式を考慮したためである。これと同時に現在の第1次の試作機では、極微量の分析を必要とする研究用としての大出力のNd:YAGレ-ザ-の導入口を備えている。空冷のアルゴンレ-ザ-を光源として基本性能をフルオレッセンを用いて調べた。その結果0.1ngまでは検量線の直線性がきわめて良好なものが得られた。また検出の精度については、この濃度領域までは全く問題がなかった。さらに0.001ngまでの検出の可能性が確認された。次ぎに本装置を用いて実験料の検出を試みた。プロスタグランジン標品をADAM試薬で標識し、HPLCのODSカラムで分離を行いYAGレ-ザ-の第3高長波(355nm)を励起光源とし、410nmの蛍光の検出を行った。その結果、現時点では従来法に比べ2から3桁の感度の向上が見込まれている。なお本結果に関しては第51回分析科学討論会にて発表予定である。本装置を用いた超微量分析に必要なプロスタグランジン・ロイコトリエン類の調整を購入および生物試料からの抽出精製を続けることにより行った。プロスタグランジン・ロイコトリエン類への適切な蛍光励起波長を持つ発色団を有する蛍光物質による標識は、現在のところ分子中のカルボン酸を標識するものが主流であり、ADAM試薬(9-アントリルジアゾメタン)が最良であるが、試薬の安定性ならびに未反応試薬の分離に問題があり、他の標識試薬の設計、導入を検討中である。
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