1990 年度実績報告書

多孔質ガラスを用いた核酸の合成

研究課題

研究課題/領域番号	63850186
研究機関	宮崎大学
研究代表者	今田清久宮崎大学, 工学部, 教授 (00037748)
研究分担者	林幸男宮崎大学, 工学部, 助教授 (90148916)
キーワード	多孔質ガラス / 核酸合成 / Merrifield法
研究概要	核酸の合成に用いる多孔質ガラスの表面の構造について研究した。ガラス表面に存在するシラノ-ル基、〓SiーOH、の表面密度を推定し7〜9μmol・m^<-2>とした。この値はシリカゲルなどについて従来報告されている値の中で小さめのものと一致し、注意深い測定によってこの値か、これよりもやや小さめの値に収斂すべきものであろうと予想される。この値はわれわれ固有のSPG組成についても、従来から用いられているVycor組成に基づくものについてもほぼ同じで、大差はない(研究発表の1)。また、この値はクリストバライトのような類似の結晶について観察される値とも近い(研究発表の7)。このような多孔質ガラスをシランカップリング剤を用いてアミノアルキル化すると2〜3μmol・m^<-2>程のアミノアルキ基が導入されるがこの表面アミノ基密度は立体化学的な観点からするとヌクレオチドの寸法に比べてやや過密に過ぎる。シランカップリング反応の際に、メチルトリメトキシシラン(TMS)などを用いてアミノ基の量を5μmol・m^<-2>程度に制御する必要がある。このほか細孔径やガラス骨格の組成などを最適化することにより高い効率でDNAを合成出来るようになった。これにより遺伝子プロ-ブの合成がより適確になり、より高い重合度のヌクレオチドが合成出来るようになった。このような担体を蛋白質工学の全体の流れの中で有効に活用する方向で研究を進めるために、土壌から採取した野生株の遺伝子をクロ-ン化してCMCア-ゼ酵素を生産する組み替え体を準備した。今後この技術を組み込んでプラクハイブリダイゼ-ション用のプロ-ブの合成、生産された酵素の固定化、さらには独自のペプチドを担持したアフィニティ-クロマトグラフィ-などへと発展させたい。このことに関しては、重点領域・機能性材料に新計画を申請した。多孔質ガラスを蛋白質工学に広く応用する研究を更に進める。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] 今田清久,坂上勝伺,川端裕人,堤信夫,中島忠夫,信原一敬: "“多孔質ガラスの表面状態とその化学修飾"" 日本化学会誌. 407-414 (1990)
[文献書誌] S.Hayashi,K.Imada et al.: "“Production of a fructosyl transferring enzyme by Aureobasidium sp.ATCC 20524"" J.Industrial Microbiology. 5. 395-400 (1990)
[文献書誌] S.Hayashi,K.Imada et al.: "Obseervation of the Chemical Structure of Fructooligosaccharide Produced by an Enzyme from Aureobasidium" Current Microbiology. 19. 175-177 (1989)
[文献書誌] K.OKUYAMA,K.Imada et al.: "Molecular Structure of AibーContaining Oligopeptides Bocー(Leu_3ーAib)_2ーOBzl andBocー(Leu_3ーAib)_3ーOBzl" Polymer Journal. 20. 707-710 (1988)
[文献書誌] S.Hayashi,M.Nonoguchi,Y.Takasaki,H.Ueno and K.Imada: "“Purification and Properties of βーFuructofuranosidase from Aureobasidium sp.ATCC 20524"" J.Industrial Microbiology. (1991)
[文献書誌] S.Hayashi,M.Nonoguchi,Y.Takasaki,H.Ueno and K.Imada: "“Nutritional Status of Aureobasidium sp.ATCC 20524 for the production of βーFuructofuranosidase"" World J.Microbiology and Biotechnology. (1991)
[文献書誌] 今田清久: "泉フォラム、Int.Workshop on Suprahybridization between Biocomponents and Artificial Materials 講演予稿集" Possibilities of Glass Surface as the Support for Biological and Medical Uses.Porous Glass Support for DNA Synthesis.2-2 (1990)
[文献書誌] 今田清久: "SPG研究論文集・SPG研究会" 多孔質ガラスの表面状態と細孔内表面の化学修飾多孔質ガラス支持体による核酸の合成. 8-9 (1989)

1990 年度 実績報告書

多孔質ガラスを用いた核酸の合成

研究代表者

今田 清久 宮崎大学, 工学部, 教授 (00037748)

研究成果

[文献書誌] 今田 清久,坂上 勝伺,川端 裕人,堤 信夫,中島 忠夫,信原 一敬: "“多孔質ガラスの表面状態とその化学修飾"" 日本化学会誌. 407-414 (1990)

[文献書誌] S.Hayashi,K.Imada et al.: "“Production of a fructosyl transferring enzyme by Aureobasidium sp.ATCC 20524"" J.Industrial Microbiology. 5. 395-400 (1990)

[文献書誌] S.Hayashi,K.Imada et al.: "Obseervation of the Chemical Structure of Fructooligosaccharide Produced by an Enzyme from Aureobasidium" Current Microbiology. 19. 175-177 (1989)

[文献書誌] K.OKUYAMA,K.Imada et al.: "Molecular Structure of AibーContaining Oligopeptides Bocー(Leu_3ーAib)_2ーOBzl andBocー(Leu_3ーAib)_3ーOBzl" Polymer Journal. 20. 707-710 (1988)

[文献書誌] S.Hayashi,M.Nonoguchi,Y.Takasaki,H.Ueno and K.Imada: "“Purification and Properties of βーFuructofuranosidase from Aureobasidium sp.ATCC 20524"" J.Industrial Microbiology. (1991)

[文献書誌] S.Hayashi,M.Nonoguchi,Y.Takasaki,H.Ueno and K.Imada: "“Nutritional Status of Aureobasidium sp.ATCC 20524 for the production of βーFuructofuranosidase"" World J.Microbiology and Biotechnology. (1991)

[文献書誌] 今田 清久: "泉フォラム、Int.Workshop on Suprahybridization between Biocomponents and Artificial Materials 講演予稿集" Possibilities of Glass Surface as the Support for Biological and Medical Uses.Porous Glass Support for DNA Synthesis.2-2 (1990)

[文献書誌] 今田 清久: "SPG研究論文集・SPG研究会" 多孔質ガラスの表面状態と細孔内表面の化学修飾 多孔質ガラス支持体による核酸の合成. 8-9 (1989)

1990 年度実績報告書

今田清久宮崎大学, 工学部, 教授 (00037748)

[文献書誌] 今田清久,坂上勝伺,川端裕人,堤信夫,中島忠夫,信原一敬: "“多孔質ガラスの表面状態とその化学修飾"" 日本化学会誌. 407-414 (1990)

[文献書誌] 今田清久: "泉フォラム、Int.Workshop on Suprahybridization between Biocomponents and Artificial Materials 講演予稿集" Possibilities of Glass Surface as the Support for Biological and Medical Uses.Porous Glass Support for DNA Synthesis.2-2 (1990)

[文献書誌] 今田清久: "SPG研究論文集・SPG研究会" 多孔質ガラスの表面状態と細孔内表面の化学修飾多孔質ガラス支持体による核酸の合成. 8-9 (1989)