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1990 年度 研究成果報告書概要

DNA組換え乳酸菌を用いた齲蝕ワクチンの開発

研究課題

研究課題/領域番号 63870086
研究種目

試験研究(B)

配分区分補助金
研究分野 小児・社会系歯学
研究機関国立予防衛生研究所

研究代表者

古賀 敏比古  国立予防衛生研究所, 歯科衛生部, 部長 (10037541)

研究分担者 太田 博崇  ライオン株式会社, 第一応用研究所, 研究員
高橋 一郎  国立予防衛生研究所, 歯科衛生部, 研究員 (20206791)
岡橋 暢夫  国立予防衛生研究所, 歯科衛生部, 主任研究官 (40150180)
研究期間 (年度) 1988 – 1990
キーワード齲蝕 / Streptococcus mutans / Streptococcus sobrinus / 乳酸菌 / ワクチン
研究概要

本研究では、遺伝子操作技術を用いて齲蝕の原因菌であるStreptococcus mutansの分子量19万のタンパク質抗原(PAc)をコ-ドする遺伝子を乳酸菌に組み込んだ齲蝕ワクチンの開発を試みて、以下の結果を得た。
1.S.mutans MT8148株(血清型c)のpac遺伝子をクロ-ン化し、その全塩基配列を決定した。その結果、PAcをコ-ドする遺伝子は4,695個の塩基対からなることが明らかになった。これは1,565個のアミノ酸からなる分子量170,773のポリペプチドに対応する。
2.PAcの生物学的機能を解明するために、クロ-ン化したpac遺伝子を利用していくつかの変異株を作製した。PAc欠落株では、PAc産生株に比べて菌体疎水性が著しく低くかった。PAc欠落株の唾液で被覆した歯面への付着能は、PAc産生株に比べて著しく低かった。これらの結果から、S.mutans菌体表層のPAcは、歯面に吸着された唾液タンパク質との疎水性結合を介した歯面への菌体付着に関与していると考えられた。
3.Streptococcus sobrinusの分子量19万のタンバク質抗原(PAg)をコ-ドする遺伝子をクロ-ン化し、その塩基配列をpac遺伝子のものと比較したところ、両遺伝子の中流域において高い相同性が認められた。
4.S.mutansのpac遺伝子をシャトルベクタ-pSA3 に連結し、pSM1と名付けた組換えプラスミドを作製した。このプラスミドで乳酸菌の1種であるStreptococcus lactis を形質転換した。この組換え乳酸菌は菌体内にPAcを産生した。ついで、この組換え乳酸菌の死菌体をマウスの経口投与したあとで、血清中のIgG抗体価と唾液中のIgA抗体価を測定した。その結果、PAcに特異的な血清IgGや唾液や唾液IgAが誘導された。

  • 研究成果

    (24件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (24件)

  • [文献書誌] N.Okahashi et al.: "Cloning of a surface protein antigen from serotype c Streptococcus mutans" Molecular Microbiology. 3. 221-228 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] S.Hamada et al.: "Purification and characterization of waterーinsoluble glucan synthesiszing cellーassociated glucosyltransferase of serotype c Streptococcus mutans" Journal of General Microbiology. 135. 335-344 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] H.Ohta et al.: "Characterization of a cellーsurface protein antigen of hydrophilic Streptococcus mutans strain GSー5" Journal of General Microbiology. 135. 981-988 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] N.Okahashi et al.: "Molecular characterization of a surface protein antigen gene from serotype c Streptococcus mutance,implicated in dental caries" Molecular Microbiology. 3. 673-678 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] I.Takahashi et al.: "Homology between surface protein antigen genes of Streptococcus sobrinus and Streptococcus mutans" FEBS Letters. 249. 383-388 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] T.Koga et al.: "Effect of subculturing on expression of a cellーsurface protein antigen by Strptococcus mutans" Journal of General Microbiology. 135. 3199-3207 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] T.Koga et al.: "Surface hydrophobicity,adherence,aggregation of cellーsurface protein antigen mutants of Streptococcus mutans serotype c" Infection and Immunity. 58. 289-296 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] F.Ota et al.: "Crossーreactive polysaccharide antigens (types a,d,and h)of the mutans group of streptococci:different molecular forms of the types as distiguishable by monoclonal antibodies" Zentralblatt fur Bakteriologie. 272. 294-305 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] M.Iwaki et al.: "Oral immunization with recombinant Streptococcus lactis carring the Streptococcus mutans surface protein antigen gene" Infection and Immunity. 58. 2929-2934 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] N.Okahashi et al.: "Construction of a NotI restriction map of the Streptococcus mutans genome" Journal of General Microbiology. 136. 2217-2223 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] I.Takahashi et al.: "Intranasal immunization with recombinant protein antigen of serotype c Streptococcus mutans and cholera toxin B subunit" Archives of Oral Biology. 35. 475-477 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] I.Takahashi et al.: "Immunogenicity and protective effect against oral colonization by Streptococcus mutans by synthetic peptides of a streptococcal surface protein antigen" Journal of Immunology. 146. 332-336 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] N. Okahashi et al: "Cloning of a surface protein antigen from serotype c Streptococcus mutans." Molecular Microbiology. 3. 221-228 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] S. Hamada et al: "Purification and characterization of water-insoluble glucan synthesizing cell-associated glucosyltransferase of serotype c Streptococcus mutans." Journal of General Microbiology. 135. 335-344 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] H. Ohta et al: "Characterization of a cell-surface protein antigen of hydrophilic Streptococcus mutans strain GS-5." Journal of General Microbiology. 135. 981-988 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] N. Okahashi et al: "Molecular characterization of a surface protein antigen gene from serotype c Streptococcus mutans, implicated in dental caries." Molecular Microbiology. 3. 673-678 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] I. Takahashi et al: "Homology between surface protein antigen genes of Streptococcus sobrinus and Sreptococcus mutans." FEBS Letters. 249. 383-388 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] T. Koga et al: "Effect of subculturing on expression of a cell-surface protein antigen by Streptococcus mutans." Journal of General Microbiology. 135. 3199-3207 (1989)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] T. Koga et al: "Surface hydrophobicity, adherence, aggregation of cell-surface protein antigen mutants of Streptococcus mutans serotype" Infection and Immunity. 58. 289-296 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] F. Ota et al: "Cross-reactive polysaccharide antigen (type a, d, and h) of the the mutans group of streptococci : different molecular forms of the types as distinguishable by monoclonal antibodies." Zentralblatt fur Bakteriologie. 272. 294-305 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] M. Iwaki et al: "Oral immunization with recombinant Streptococcus lactis carring the Streptococcus mutans surface protein antigen gene." Infection and Immunity. 58. 2929-2934 (1990)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] N. Okahashi et al: "Construction of a NotI restriction map of the Streptococcus mutans genome." Journal of General Microbiology. 135. 2217-2223 (1990)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] I. Takahashi et al: "Intranasal immunization with recombinant protein antigen of serotype c Streptococcus mutans and cholera toxin B subunit." Archives of Oral Biology. 35. 475-477 (1990)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] I. Takahashi et al: "Immunogenicity and protective effect against oral colonization by Streptococcus mutans by synthetic peptides of a streptococcal surface protein antigen." Journal of Immunology. 146. 332-336 (1991)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より

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公開日: 1993-08-12  

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