腸管神経による免疫系・上皮系バリアおよび腸内フローラ制御機構解析

2016 年度 実績報告書

• 研究領域: 免疫四次元空間ダイナミクス
• 研究課題/領域番号: 15H01149
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 幡野 雅彦 千葉大学, 大学院医学研究院, 教授 (20208523)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 腸管神経 / 腸管免疫 / 腸内細菌叢 / 上皮バリア

研究実績の概要

腸管神経細胞の増加しているNcx KOマウスを用いて腸管バリア機構・腸管免疫・腸内細菌叢について解析した。Ncx KO マウスは一酸化窒素（NO)を産生する腸管神経が増加している。上皮細胞のE-カドヘリンの発現を調べたところKOマウスでは減少しておりまた、透過性も亢進していた。また、ニトロチロシン抗体により染色される上皮細胞が増加していた。ｎNOSの阻害剤を投与したところカドヘリンの発現は正常に回復したことより腸管神経より出るNOにより上皮細胞障害が起きていることが示唆された。
次に腸内細菌叢について糞便培養、１６SｒRNA解析およびメタゲノム解析を行った。培養法では通性嫌気性菌がKOマウスで野生型の10～100倍に増加、１６SｒRNAおよびメタゲノム解析で腸内細菌科の細菌が増加していることが明らかになった。さらにKOマウスでは一酸化窒素還元酵素であるNitric oxide reductase (NORV)遺伝子を持つ菌が増加していた。NORV陽性細菌はNOによる殺菌作用から逃れるため病原性が高いと言われている。そこで野生型マウスに野生型およびKOマウスの糞便をそれぞれ移植しDSS腸炎を誘導したところKOマウス糞便を移植したマウスにおいてより悪化する傾向にあった。これらの結果より腸内において高濃度のNOに暴露されることによりNORV陽性の腸内細菌が選択的に増加しより病原性の高いものとなったことが示唆される。
また、腸管免疫系について解析した結果、KOマウスlamina propriaにおいて好酸球が増加していることが明らかとなった。好酸球をリクルートするケモカイン・サイトカインを調べたところKO腸管においてeotaxinおよびIL-5が増加していることが明らかとなった。これら因子を産生する細胞および好酸球増加の生理的意義について検討している。

現在までの達成度 (段落)

28年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

28年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Suppression of T Cell Autophagy Results in Decreased Viability and Function of T Cells Through Accelerated Apoptosis in a Murine Sepsis Model. (2017)
  • 著者名/発表者名: Oami T, Watanabe E, Hatano M, Sunahara S, Fujimura L, Sakamoto A, Ito C, Toshimori K, Oda S.
  • 雑誌名: Crit Care Med. 巻: 45 ページ: e77-e85
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Development of chronic allergic responses by dampening Bcl6-mediated suppressor activity in memory T helper 2 cells. (2017)
  • 著者名/発表者名: Ogasawara T, Hatano M, Satake H, Ikari J, Taniguchi T, Tsuruoka N, Watanabe-Takano H, Fujimura L, Sakamoto A, Hirata H, Sugiyama K, Fukushima Y, Nakae S, Matsumoto K, Saito H, Fukuda T, Kurasawa K, Tatsumi K, Tokuhisa T, Arima M.
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci U S A. 巻: 114 ページ: E741-E750
  • DOI: 10.1073/pnas.1613528114
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Genetic and Pharmacological Inhibition of p38α Improves Locomotor Recovery after Spinal Cord Injury. (2017)
  • 著者名/発表者名: Umezawa H, Naito Y, Tanaka K, Yoshioka K, Suzuki K, Sudo T, Hagihara M, Hatano M, Tatsumi K, Kasuya Y.
  • 雑誌名: Front Pharmacol. 巻: 8 ページ: ―
  • DOI: 10.3389/fphar.2017.00072
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Transcriptional repression of p27 is essential for murine embryonic development. (2016)
  • 著者名/発表者名: Teratake Y, Kuga C, Hasegawa Y, Sato Y, Kitahashi M, Fujimura L, Watanabe-Takano H, Sakamoto A, Arima M, Tokuhisa T, Hatano M.
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 6 ページ: 26244
  • DOI: 10.1038/srep26244.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Systemic and Local Cytokine Profile in Biliary Atresia. (2016)
  • 著者名/発表者名: Saito T, Sakamoto A, Hatano M, Iwai J, Higashimoto Y, Yoshida H.
  • 雑誌名: Eur J Pediatr Surg. 巻: ― ページ: ―
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 腸管神経細胞分化におけるNcxの機能解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 小林茉優、幡野雅彦、坂本明美、藤村理紗、寺竹洋一、深谷小百合
  • 学会等名: 第39回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市）
  • 年月日: 2016-12-01
• [学会発表] ２．腸管神経過多マウスを用いた朝刊神経系と免疫系の相互作用の解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 藤村理紗、坂本明美、幡野雅彦
  • 学会等名: 第39回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市）
  • 年月日: 2016-12-01