公募研究
平成２８年度の研究においては、第一に平成２７年度に実施したネナシカズラ‐ダイズ寄生部位細胞壁構成成分の観測結果の普遍性をもう一つの寄生系であるアメリカネナシカズラ‐シロイヌナズナ寄生系において確認を行った。すると、ネナシカズラ‐ダイズ系で顕著に観察された後生篩部でのフコシル化キシログルカンの高度蓄積が、アメリカネナシカズラ‐シロイヌナズナ系では見られないことがわかった。それに対して、吸器先端部においてネナシカズラ‐ダイズ系で観察されたLM6抗体抗原の高度蓄積はアメリカネナシカズラ‐シロイヌナズナ系でも観察され、吸器先端の探索糸と呼ばれる伸張性のある細胞の細胞壁に蓄積していることが明らかとなった。この蓄積物質を明確にするためLM２抗体ならびにヤリブ染色を実施し、その結果探索糸細胞壁に高蓄積しているのはアラビノガラクタンタンパク質（AGP）であることがわかった。アメリカネナシカズラには６７個のAGP遺伝子があるため、探索糸で発現しているAGP遺伝子をin situハイブリダイゼーションにより探索した。その結果、探索糸で発現する５つのファシクリン様AGP遺伝子を同定した。探索糸AGPの寄生における役割を明らかにするために、ヤリブ試薬の寄生部への投与や、AGP糖鎖分解酵素発現シロイヌナズナを宿主として使うこと等を実施したが、寄生を非効率化するような影響は見られなかった。今後５つのAGP遺伝子のサイレンシングを継続する。第二に吸器内での維管束分化機構に関与する遺伝子を同定するため、ネナシカズラCLE41ホモログ遺伝子の発現プロフィールと発現部位を精査した。その結果、CLE41遺伝子は維管束分化に先駆けて一過的に発現上昇し、in situハイブリダイゼーションにより道管隣接領域と宿主篩管隣接細胞で発現していることが明らかとなった。アンチセンスRNAも吸器で発現が確認された。
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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すべて 雑誌論文 (2件) (うち国際共著 1件、 査読あり 2件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (10件) (うち国際学会 3件、 招待講演 3件) 備考 (1件)
Nature Protocols
巻: 11 ページ: 2401-2418
10.1038/nprot.2016.143
Frontiers in Plant Science
巻: 7 ページ: 1114
10.3389/fpls.2016.01114
https://www.kohaokilab.com/
