| 今後の研究の推進方策 |
Schnurri-2 欠損マウスは中枢神経系において炎症反応の惹起が認められることがこれまでの研究でわかっている。そこでその炎症反応が惹起されることによる中枢神経系免疫機構の変化それに伴うシナプス、髄鞘維持機構の変化を捉える。 まずミクログリアの変化およびそれによる神経系の変化を捉えるために、ミクログリアの形態を可視化し、ミクログリアの活性化レベルを調べる。またミクログリアの活性化によるシナプス維持機構、髄鞘維持機構の変容を探るためにSchnurri-2 欠損マウスからミクログリアをMACS systemを用いて分離、抽出し、ミクログリア内におけるシナプス維持機構分子であるCX3CR1, C3Rなどの分子、貪食における鍵となる分子であるP2Yレセプターなどの発現を調べる。
さらに学習中の神経細胞集段の活動をGCaMP6fによって同一部位の同一細胞集団を、連日観察し、発火パターンを解析する。通常では発火細胞集団の特異性が高まると考えられるが、統合失調症モデルマウスではその特異性の低下とともに非特異的神経細胞の発火が起こることが予想される。またその際に同時に個体運動タイミング等を計測することによりパフォーマンスとの相関を検証する。さらにこれらの課題におけるシナプスの可塑的変化を検出するため、GFPをコードするAAVを同領域に注入し、連日観察することで構造的な可塑的変化の違いを正常群と比較する。
次に、単一シナプスレベルで学習課題下のシナプス強化がどのように変化するかを検討するため、シナプスのカルシウム応答をGCaMP6fで、形態的変化を赤色蛍光タンパクであるmCherryで、AAV によって大脳皮質運動野に導入し２光子顕微鏡にて覚醒下でのイメージングをシナプス集団に対し長期に行い、訓練下での応答するシナプスの数の増減および反応の安定性をシナプス形態と比較する。
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