| 研究領域 | 細胞競合：細胞社会を支える適者生存システム |
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| 研究課題/領域番号 |
17H05613
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| 研究機関 | 群馬大学 |
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研究代表者 |
堀居 拓郎 群馬大学, 生体調節研究所, 准教授 (00361387)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | 倍数体 / 細胞競合 / １倍体 / ４倍体 |
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| 研究実績の概要 |
マウスを始めとした哺乳類では１倍体（1n）胚および４倍体（4n）胚ともに個体として産まれることはできない。一方、それぞれを正常な2倍体（2n）胚とキメラにした場合、１倍体細胞は２倍体化した細胞のみ個体発生でき、４倍体細胞は胎盤には寄与できるが個体にはほとんど寄与できない。しかし、発生分化過程でこれらの倍数性の異なる細胞がどの段階でどのような機構で排除されていくのか明らかにした報告はほとんどない。本研究では、倍数性の異なる細胞が、発生分化過程で自らのもつ細胞運命によって排除されるのか、それとも周りを取り囲む２倍体細胞との競合によって排除されるのか明らかにする。具体的には、１倍体および４倍体のES細胞を用いて、in vitro およびin vivoにおける分化過程での2倍体細胞との細胞競合を調べる。
我々はこれまでに２倍体細胞と４倍体細胞との間には発生過程においてp53依存的な細胞競合が起きていることを示してきた（Horii et al., Sci Rep 2015）。そこで、１倍体細胞と２倍体細胞との間にも同様にp53依存的な細胞競合が起きていると予測したが、p53-KO ES細胞やp53阻害剤を用いた実験から、少なくとも1倍体と２倍体の間にはp53依存的な競合はin vitroでは起きていないことが明らかとなった。一方、１倍体細胞は培養中に培養皿から剥がれていくものが多かったため、細胞接着が関与する細胞競合が起きている可能性が示唆された。そこで、接着性の異なる培養皿を用いて、１倍体と２倍体の混合培養を行なったところ、接着性の高い培養皿では、２倍体が優勢となるのに対して、接着性の低い培養皿や浮遊培養では、１倍体と２倍体の間に細胞競合がほとんど起きていないことが明らかとなった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初はp53依存的な細胞死による細胞競合を想定していたが、１倍体と２倍体の間では少なくともp53依存的な現象は確認できなかった。一方で、予想していなかった細胞接着因子が関与した細胞競合を示唆する現象を発見しており、当初の計画とはやや異なるが、関連遺伝子の候補を絞ることができているので、この評価とした。
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| 今後の研究の推進方策 |
H29年度の研究成果より、H30年度は細胞接着に関与する遺伝子を抑制もしくは強発現させた１倍体細胞株を樹立し、細胞競合がどう変化するのか検討する予定である。候補遺伝子として、E-カドヘリン、RasおよびSrcを想定している。遺伝子の抑制については、CRISPR/Cas法により行う予定である（Horii et al., PeerJ, 2013）。
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