| 研究領域 | ネオ・セルフの生成・機能・構造 |
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| 研究課題/領域番号 |
17H05802
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| 研究機関 | 東海大学 |
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研究代表者 |
穂積 勝人 東海大学, 医学部, 教授 (30246079)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | Notch / Notchリガンド / Treg細胞 / Tfh細胞 / パイエル板 |
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| 研究実績の概要 |
我々はこれまで、①Notchリガンド：Dll4がパイエル板にて特徴的に発現すること、②パイエル板内のT細胞、特にFoxp3陽性の制御性T（Treg）細胞にNotch1シグナルが発動していること、③Dll4遺伝子欠失は、上記Notch1シグナルの消失をもたらすことを見出し、T細胞を介したパイエル板でのIgA産生系におけるNotchシグナルの生理的意義について追求した。
まず、CD4-Cre、Notch1/Notch2-floxedマウス（T細胞にてNotch1/2が消失）パイエル板でのT細胞、B細胞について調べたところ、濾胞ヘルパーT（Tfh）細胞がほとんど消失し、IgAを産生する胚中心（GC）B細胞が著減していた。さらに同マウスでは、腸管粘膜固有層（LP）に残存するIgA+ GCB細胞にて、IgA遺伝子の体細胞高頻度変異（SHM）が低下していた。一方、同マウス・パイエル板では、Foxp3+ Treg細胞の出現頻度が大きく上昇し、かつ機能的に成熟した性状（Tcf1陰性）を有するTreg細胞が増加した。以上の結果は、パイエル板にて特徴的に発現するDll4が、消化管抗原応答性のTreg細胞にNotchシグナルを付与し、Tfh細胞への分化転換に寄与している可能性を示唆した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
遺伝子改変マウスの導入作業に手間取り、予定の実験を遂行しきれていない。
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| 今後の研究の推進方策 |
Ccl19-Cre、Dll4-floxedマウス（パイエル板ストローマ細胞にてDll4遺伝子を欠失）での解析を行う。CD4-Cre、Notch1/2-floxedマウスの交配を進め、パイエル板での形質と、腸内細菌叢との関連を明確にする。
また、東京大学・堀先生より供与いただいたFoxp3-iCre、Rosa-lsl-tdRFP、Foxp3-hCD2マウスよりTreg細胞とnon-Treg細胞を分離し、CD3eKOmへ移植後、パイエル板（あるいはその他のリンパ組織）でのTfh細胞等を調べ、Foxp3発現（hCD2）と陽性履歴（tdRFP）を確認する。この結果から、生後（腸内細菌叢の確立後）、パイエル板でのTreg/Tfh分化転換の頻度を明確にする。
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