本研究では、原虫に共生するウイルスおよび内在性ウイルスの探索、および、ウイルス・原虫・宿主動物で構成される超個体におけるウイルスの機能を明らかにする。 昨年度の予備実験結果から継代によるウイルス除去は難しいと考えられるため、RNA依存性RNAポリメラーゼ(RdRp)阻害薬を用いてトリコモナスからウイルス除去を試みた。リーシュマニアに共生するウイルスに有効な2種類のRdRp阻害薬を添加した状態でトリコモナスを継代したが除去することができなかった。トリコモナスウイルスとリーシュマニアウイルスのRdRpの構造の違いによって阻害薬が作用しなかった可能性がある。引き続き条件検討を進め、詳細に解析する。 トリコモナスウイルスの除去が難航していることから、新たに人や動物で消化管感染症を引き起こすジアルジアを用いてウイルス・原虫相互作用を調べることとした。ジアルジアウイルスは報告されている原虫ウイルスの中で唯一水平感染し得ることが報告されている。動物由来のジアルジアに共生するウイルスゲノムの全長配列を決定し、ウイルス感染・非感染ジアルジアのトランスクリプトーム解析を行うとともに動物への感染性や組織向性の変化等についても調べる。現在ジアルジアウイルスゲノム配列の解析を行っている。データベース上に報告されているジアルジアウイルスのゲノム配列は少なく、これらとの比較解析も行う。 原虫ウイルスゲノム・カプシドが宿主細胞内センサー(Toll-like receptor(TLR)やRIG-I-like receptor (RLR))との相互作用(原虫ウイルス・宿主間)を引き起こすか調べる。核酸を認識するTLRおよびRLRのノックアウト培養細胞の準備を行った。これらのセンサーとトリコモナスウイルスおよびジアルジアウイルス由来RNAとの相互作用を調べ、インターフェロン産生に関連するか否かについて解析する。
|