| 研究領域 | 分子夾雑の生命化学 |
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| 研究課題/領域番号 |
18H04541
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| 研究機関 | 東京農工大学 |
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研究代表者 |
篠原 恭介 東京農工大学, 工学(系)研究科(研究院), 特任准教授 (20527387)
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| 研究期間 (年度) |
2018-06-29 – 2020-03-31
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| キーワード | 分子シャペロン / 脱凝集 / 分子夾雑 |
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| 研究実績の概要 |
今年度はHsp104の構造変化に焦点を当て解析を行った。分子夾雑条件下（モデル基質カゼインの存在下）で高速原子間力顕微鏡(AFM)観察を行ったところ、コントロールに比べてHsp104の構造変化頻度の上昇が見られた。前年度までに他の構造解析法により見出していたスプリット型リングの出現頻度も上昇した事から、このコンフォメーションは基質に反応するサイクルの中の1状態である事が示唆された。また、Hsp104のアミロイド線維に対する反応の可視化にも挑戦した。アミロイド線維の脱会合に際してHsp104は様々な反応様式を示す事が観察された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
試験管内のHsp104の観察が当初の研究計画よりも大幅に進んだ。一方で培養細胞におけるHsp104の脱凝集活性の検証についてヒト培養細胞に目的蛋白質を発現させるプラスミド構築が遅れ、2020年度に入ってようやくデータが取得でき始めている。
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| 今後の研究の推進方策 |
ヒト培養細胞の実験系が動きだしたので（2020年6月現在）、集中的に実験を進める。また、精製蛋白質を用いた試験管の系ではHsp104の構造観察の再現性の確認を進める。同時に初年度に得られた生化学実験（基質との共沈実験・蛍光観察）の再現性も確認する。外部発表に向けて結論を強くしていく。
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