光合成複合体間の連係プレイにおける構造基盤の解明

2019 年度 実績報告書

• 研究領域: 光合成分子機構の学理解明と時空間制御による革新的光ー物質変換系の創製
• 研究課題/領域番号: 18H05153
• 研究機関: 茨城大学
• 研究代表者: 大友 征宇 茨城大学, 理工学研究科(理学野), 教授 (10213612)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: 光合成 / 電子伝達 / 光電変換

研究実績の概要

本研究は、天然光合成の初期過程における集光・電荷分離と電子移動間の連係プレイ(Interplay)に関するものである。これらの素機能を担う光捕集複合体LH1、反応中心RC、水溶性電子伝達タンパク質HiPIPと膜内チトクロム(Cyt) bc1を研究対象とし、LH1-RC、HiPIPとCyt bc1からなる光捕集・電荷分離・電子伝達の３機能を併せもつ超分子複合体の共結晶化と構造解析を行い、これらの複合体間において機能調節を司る相互作用の構造基盤の解明を目指す。
昨年度HiPIPとLH1-RCの共結晶の形成が確認できたことを受けて、本年度は高分解能を与える共結晶化条件の最適化を行ってきた。HiPIPの割合とpHを細かく変化させて調べた結果、反応中心RCのCサブユニット近傍にHiPIP由来と思われる電子密度が現れた。HiPIP対LH1-RCのモル比の増加に伴い、ある閾値から結晶の回折分解能の低下が見られたことから最適なHiPIP：LH1-RC量論比が存在することがわかった。現在共結晶化条件の最適化を行っているとともに、HiPIPの構造を導入して共結晶の構造モデル構築を開始した。一方、膜タンパク質の性質と複合体の形成に大きな影響を及ぼす膜リン脂質組成について31P-NMRと誘導結合プラズマ蛍光発光（ICP-AES）を用いて同定した。ほとんどの光合成細菌から精製されたLH1-RCにはカルジオリピン（CL）が主成分であることが判明され、膜中でマイナー成分のCLが精製されたLH1-RCに特異的に強く結合していることが示唆された。この成果は国際学術誌（Biochim. Biophys. Acta-Bioenergetics 1860, 461; 2019）に掲載された。

現在までの達成度 (段落)

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Phospholipid distributions in purple phototrophic bacteria and LH1-RC core complexes (2019)
  • 著者名/発表者名: Nagatsuma S.、Gotou K.、Yamashita T.、Yu L.-J.、Shen J.-R.、Madigan M.T.、Kimura Y.、Wang-Otomo Z.-Y.
  • 雑誌名: Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Bioenergetics 巻: 1860 ページ: 461～468
  • DOI: 10.1016/j.bbabio.2019.04.001
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] A Dual Role for Ca2+ in Expanding the Spectral Diversity and Stability of Light-Harvesting 1 Reaction Center Photocomplexes of Purple Phototrophic Bacteria (2019)
  • 著者名/発表者名: Imanishi Michie、Takenouchi Mizuki、Takaichi Shinichi、Nakagawa Shiori、Saga Yoshitaka、Takenaka Shinji、Madigan Michael T.、Overmann Jorg、Wang-Otomo Zheng-Yu、Kimura Yukihiro
  • 雑誌名: Biochemistry 巻: 58 ページ: 2844～2852
  • DOI: 10.1021/acs.biochem.9b00351
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Blastochloris tepida, sp. nov., a thermophilic species of the bacteriochlorophyll b-containing genus Blastochloris (2019)
  • 著者名/発表者名: Madigan, M. T, Resnick, S. M., Kempher, M, L., Dolnalkova, A. C., Takaichi, S., Wang-Otomo, Z.-Y., Toyoda, A., Kurokawa, K., Mori, H. and Tsukatani, Y.
  • 雑誌名: Arch. Microbiol. 巻: 201 ページ: 1351-1359
  • DOI: 10.1007/s00203-019-01701-4
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Properties and structure of a low-potential, penta-heme cytochrome c552 from a thermophilic purple sulfur photosynthetic bacterium Thermochromatium tepidum (2019)
  • 著者名/発表者名: Chen, J.-H., Yu, L.-J., Boussac, A., Wang-Otomo, Z.-Y. Kuang, T. & Shen, J.-R.
  • 雑誌名: Photosynth. Res. 巻: 139 ページ: 281-293
  • DOI: 10.1007/s11120-018-0507-y
  • 査読あり / 国際共著
• [学会発表] METAL ION-INDUCED STRUCTURAL AND FUNCTIONAL CHANGES IN BACTERIAL LIGHT-HARVESTING COMPLEXES (2019)
  • 著者名/発表者名: S. Otomo
  • 学会等名: The 3rd International Conference on Solar Fuels (ISF-3), International Conference on Artificial Photosynthesis 2019 (ICARP2019 )
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Spectroscopic characterization of a bacteriochlorophyll b-based LH1-RC complexes from thermophilic purple bacterium Blactochloris tepida (2019)
  • 著者名/発表者名: Yukihiro Kimura, Ryuta Seto, Tomoaki Kawakami, Rikako Kishi, Michie Imanishi, Shinichi Takaichi, Shinji Takenaka, Michael T. Madigan, Seiu Otomo
  • 学会等名: 第57回日本生物物理学会大会
• [学会発表] A dual role for calcium in expanding the spectral diversity and stability of LH1-RC photocomplexes of purple phototrophic bacteria (2019)
  • 著者名/発表者名: Michie Imanishi, Mizuki Takenouchi, Shinichi Takaichi, Shiori Nakagawa, Yoshitaka Saga, Shinji Takenaka, Michael T. Madigan, Jorg Overmann, Seiu Otomo and Yukihiro Kimura
  • 学会等名: 第57回日本生物物理学会大会
• [学会発表] 好熱性光合成細菌由来のチトクロムbc1複合体、シャペロニン及びリン酸結合タンパク質の単離精製と結晶化 (2019)
  • 著者名/発表者名: 山下琢也, 川上知朗, 大友征宇
  • 学会等名: 日本光合成学会