公募研究
１．ヘリオバクテリア反応中心の結晶化・構造解析：ヘリオバクテリア反応中心のコアタンパクについては、ようやく空間群R32結晶（結晶学的非対称）の高分解能解析（分解能2.28Å）が終了した。2つの構造が最終的に得られ（Form 1とForm 2）、さらにForm 2のキノン結合部位周辺には2つのconformers（立体構造異性体; molAとmolB）が観察された。一方、ヘリオバクテリア反応中心は電子供与体としてシトクロムc（PetJ）、末端電子受容体としてFA/FBタンパク（PshB）をサブユニットとしてもつ複合体であるが、反応中心の可溶化・精製段階で容易に外れてしまうことが分かっている。そこでPetJおよびPshBの大腸菌による大量発現系を構築し、Ｘ線結晶構造解析に取り組んだ。さらに複合体としての分子構築の情報を得るためにCryo電顕による解析も進めたところ、コアタンパクにPshBを結合させた複合体についてはデータ取得に成功した。コアタンパクにPetJサブユニットを結合させた複合体も、現在、解析中である。２．緑色イオウ細菌のRieske/cyt b型シトクロム複合体の可溶化・精製の検討：b-DDM以外の界面活性剤を試みた結果、コール酸・b-OGの混合界面活性剤による可溶化が最も効率よいことが判明した。３．電子伝達タンパク質の分子間相互作用のNMR解析： これまでのRieske/cyt bシトクロム複合体とcyt c-556との分子間相互作用の解析から、Rieske の[2Fe-2S]クラスター近傍の相互作用部位が同定された。この構造情報をもとにドッキングモデルを構築したところ、水溶性タンパク質の電子伝達で見られるような静電的な長距離相互作用は必要ではなく、近接タンパク質間に生じる非極性相互作用により電子伝達に適した配向が実現することが明らかとなった。
令和2年度が最終年度であるため、記入しない。
すべて 2023 2022 2021 2020 その他
すべて 雑誌論文 (5件) (うち査読あり 5件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (16件) (うち国際学会 4件) 図書 (1件) 備考 (1件)
Current Research in Structural Biology
巻: 5 ページ: 100101～100101
10.1016/j.crstbi.2023.100101
Biological and Pharmaceutical Bulletin
巻: 45 ページ: 1022～1026
10.1248/bpb.b22-00220
The Journal of Chemical Physics
巻: 156 ページ: 105102～105102
10.1063/5.0077290
Reference Module in Life Sciences
巻: 1 ページ: 333～351
10.1016/B978-0-12-819460-7.00031-1
Journal of Photochemistry and Photobiology A: Chemistry
巻: 401 ページ: 112758～112758
10.1016/j.jphotochem.2020.112758
https://www.bio.sci.osaka-u.ac.jp/~ohoka/
