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細胞性粘菌の細胞塊における細胞の大規模な再配置においては、流れに逆行して集団運動を舵取りしているごく少数個の予定柄細胞が観察されることを、最近代表者らは見出した。本申請課題では、この不規則な運動を示すごく少数細胞に注目し、独自の蛍光標識手法と生細胞測定手法を組み合わせることによって、これを検出、同定し、その接触依存的な極性形成、運動形態ならびに、走化性と走化性誘引分子cAMPのリレー応答を特徴づけることを目的とした。集団内に数個しか出現しないスター細胞の特性が、組織内の細胞の大規模な再配置をいかに駆動するのか、細胞の揃い度合いについての秩序転移と、反応拡散によって出現するcAMP振動の消滅時のスター細胞の振る舞いを特徴づける。予定柄細胞サブタイプであるスター細胞をHaloタグ発現を高輝度蛍光ラベルされたHaloリガンドによって検出する系を立ち上げた。さらに、アクチンやRac-GTP、cAMP測定用の蛍光タンパクプローブと予定柄細胞、予定胞子細胞の特異的遺伝子プロモーターによって蛍光タンパクを共発現する細胞株を作出した。これらの細胞を、マウンド期、移動体期から、分散解離によって取得し、低天井チャンバー内に導入し、単一細胞の厚さの細胞塊でこの選別現象を測定するための条件だしに成功した。その結果、チャンバー内で拘束された系でも、この不規則な運動を示す細胞が出現すること、さらにこれらを長時間追跡することができた。これらの知見を組み合わせて解析を進めることで、この少数性細胞の実態の解明に近づくことが期待される。
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