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キイロショウジョウバエの雌生殖細胞維持に必須なStand still (Stil)は、BEDタイプのZincフィンガーをもち、生殖細胞特異的な転写因子、またはインスレーターであると考え、そのクロマチン制御機構の解明に取り組んだ。Stilが相互作用しているクロマチン領域を同定するために従来から用いられているChIP-seq法やCUT&RUN法を行ったが、良好な結果が得られなかった。そこで、近年に応用され始めたDamID法（アデニンのメチル化酵素DamとStilの融合タンパク質を生殖細胞に発現させ、メチル化されたStilの存在する近傍領域を次世代シーケンサーで解析を行う。現在、Damの導入遺伝子を持ったハエの作製に成功し、サンプル調整は順調である。Stilの変異体を用いたRNA-seq解析や遺伝学的解析から、Stilは減数分裂、特に減数分裂時の組み換えを制御していることを明らかにした。これらより、生殖細胞を制御するStilの分子機能は明らかになりつつあり、今年度中に論文投稿を目指す。
HemK2は、ゲノムDNAのアデニンのメチル化（6mA）を付加する酵素と考えられている。HemK2を雌の生殖細胞でノックダウンしたショウジョウバエでは、卵母細胞の発生中間期でアポトーシスが誘導され、成熟した卵細胞は見られなかった。6mAを認識する抗体を用いて、生殖細胞ゲノムDNAの修飾状態を免疫染色法にて調べたところ、野生型とHemK2ノックダウンとでは、顕著な差は見られなかった。一方、野生型卵巣のゲノムDNA、及びHemK2をノックダウンした卵巣のゲノムDNAに対して、修飾塩基を検出可能なナノポア法で6mA部位を探索したところ、HemK2依存的な6mA部位がゲノム上で200箇所程度見つかった。さらに、6mA部位の修飾割合の高い部位に注目して、その部位を認識するリーダータンパク質を探索する。
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