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シロイヌナズナのASYMMETRIC LEAVES2 (AS2)タンパク質は、葉の発生において重要なタンパク質である。AS2は細胞内で核に局在するが、核内で特定の時期に顆粒状の集合体 (AS2 body) を形成し、細胞分裂にともない二つの娘細胞に分配される。本研究では、AS2 bodyの構成因子の同定及びAS2 body形成と分配のメカニズムの解明を目指した。培養細胞を用いて、細胞周期におけるAS2 body形成のタイミングを解析したところ、AS2 bodyはM期が開始される直前に核小体の内部で形成されることが示唆された。また、染色体との関係を解析した結果、AS2はM期を通して染色体と隣接しつつ両極に移動するが、染色体とは部分的にしか共局在していないことが分かった。さらに、酵母2ハイブリッドスクリーニング、免疫沈殿法によるAS2の相互作用因子の解析を進め、複数の候補因子を同定することができた。今後、これらの因子とAS2の関係を多面的に解析することで、AS2 body形成と分配のメカニズムの解明が期待される。
また葉形成のような発生過程では周期的な細胞分裂過程における分裂方向の制御が重要なファクターとなるがそのメカニズムは不明な点が多い。昨年度までに分裂方向の制御に関与する特定のPIの下流で微小管形成やその配向が制御されていることが分かってきた。これらPIと微小管ダイナミクスを繋ぐ因子を探索するために、PI4K阻害剤を処理した培養細胞からミクロソーム画分を抽出しプロテオーム解析を行った結果、阻害剤処理時に特異的に発現変動するタンパク質を複数同定することができた。今後は、これらタンパク質の中から直接PIの下流で機能するタンパク質を同定し、分裂方向制御のメカニズム解明を目指す。
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