| 研究概要 |
本研究では,細胞内での核の3次元形態や,核のひずみ,核の力学特性を精密に計測し,核に生じる力を求める手法を確立していくとともに,力の要因となる核内外の要素を明らかにしていく.そして,細胞の分化の違いなどによって,核の形態や核内の応力場がどのように変化していくのか,明らかにしていくことを目的としている.
研究初年度は,生理的な細胞内にて,核膜に生じていると考えられるひずみを精密に求めるための手法の確立を目指した.まず,新たに購入した顕微鏡用の電動XY精密ステージを,現有するナノ秒レーザシステムを備えた倒立型蛍光顕微鏡に組み込み,生細胞内の核膜を0.5～1μm幅で精密に切開できる系を構築した.核膜局所によって核膜切開部が開く場合や,ほとんど変化が見られない場合があり,核膜内にはざまざまな大きさ・方向の残留ひずみ生じていることが示唆された.
また,基板上で培養した血管平滑筋細胞を対象として,現有する共焦点レーザ顕微鏡を用いて精密に計測した.細胞を無血清培地中で培養すると,α-smooth muscle actinの発現量の上昇と共に核面積に減少傾向が見られ,核膜上にアクチンストレスファイバが密着し,部分的に陥没しているような箇所が見られた.このことから,平滑筋細胞の収縮性変化によって,核に加わる力の分布が大きく変化する可能性が考えられた.
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