| 研究実績の概要 |
A1. CF-HBE における RFFL PPI 阻害剤の有効性評価: RFFL PPI 阻害剤 化合物A は CF-HBE においても，CF 治療剤 Orkambi 存在下で CFTR 機能を改善する傾向が観察された．他の CF 治療剤存在下でも，化合物A が治療効果を増強するか否かを評価する予定である．
A2. RNF5/RNF185特異的二重阻害剤の同定: ケミカルアレイスクリーニングにより同定した候補化合物について，SPR 解析，DSF thermal shift assayにより RNF5, RNF185 と結合する化合物を同定した．一部の化合物は，in vitro Ub assay により，E3 リガーゼ活性を高濃度で阻害する可能性が示唆された．
A3. RNF5，RNF185のX線結晶構造解析: RNF185 断片のX線結晶構造解析に成功した．
A4. RNF5-CFTR, RNF185-CFTR相互作用領域の同定: 精製タンパク質を用いた AlphaLISA により，RNF5, RNF185 の細胞質領域と，CFTR-NBD1 が直接的に相互作用することを見出した．今後，NanoBiT 法により，細胞内での結合様式を評価する．
B1. CFTR 関連 DUB リガンドの同定: USP19 断片を用いたケミカルアレイスクリーニングにより，USP19 に結合する化合物候補を得た．今後，SPR 等の二次スクリーニングにより, USP19 リガンド化合物を同定する．
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