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動原体は、細胞分裂期に両極から伸びてきた紡錘体微小管と結合し、染色体分配において必須の働きを担う構造体である。動原体は、ゲノム上のセントロメアと呼ばれる領域に形成されるが、動原体が形成されるためには、セントロメアDNAが動原体タンパク質によって制御される独自の様式、すなわちセントロメアモダリティが必要である。セントロメアモダリティの理解のために、試験管内での動原体複合体を再構成することは非常に有効な方法であるが、単純な再構成と生化学的解析だけでは、不十分である。本研究では、細胞内でおこる動原体複合体の構造変化を明確にし、その構造変化のメカニズムを構造生物学・生化学的に明らかにすることを目的とした。さらに、その変化の細胞内での意義についても明らかにすること目指した。動原体のダイナミックな構造変化の再現を目指し、リン酸化・非リン酸化CENP-Cおよびリン酸化・非リン酸化CCAN複合体を調製した。現在、これらの構造については、クライオ電子顕微鏡解析を行っている。特に、リン酸化・非リン酸化でどのような構造変化が起きるのかについて注目し、構造変化に関わるアミノ酸利領域を同定する予定である。また、構造変化に関与する領域を予想し、そこに変化を加えた各種変異細胞を作成し、染色体整列、分配にかかる時間、染色体の分配動態、他の動原体タンパク質の局在性などを詳細に解析し、動原体の構造変化と染色体分配能との関係を明らかする予定である。
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