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2022 年度 実績報告書

蛍光単分子イメージングによる微小環境感知メカニズムの可視化解明

公募研究

研究領域素材によって変わる、『体』の建築工法
研究課題/領域番号 21H05780
研究機関京都大学

研究代表者

山城 佐和子  京都大学, 生命科学研究科, 講師 (00624347)

研究期間 (年度) 2021-09-10 – 2023-03-31
キーワードメカノバイオロジー / 剪断応力 / 細胞膜タンパク質 / 細胞接着 / 蛍光1分子顕微鏡 / 定量生物学 / 微小環境
研究実績の概要

生体において、細胞を取り囲む微小環境に対する細胞応答は、器官形成や組織の生理機能に必須である。本研究は、細胞が微小環境を感知し、外界の情報を細胞内に伝達する仕組みを明らかにすることを目的とし、細胞内蛍光単分子イメージングを活用して研究を行った。本研究成果は、主に以下の(1)と(2)がある。研究成果(1)では、研究代表者が確立したナノメートルスケールの細胞内1分子追跡技術により、接着斑分子タリンが構造変化を伴いながら、一過的にアクチン線維と接着分子インテグリンを連結する現象 (elastic transient clutch) を明らかにした。さらに統計解析により、タリンの連結・解離キネティクスを算出した。また、タリンを介した両者の連結には、アクチン流動の牽引が引き起こすタリン rod 領域のアンフォールディングが必要であることを、タリン変異体の機能解析により明らかにした。これらの研究成果は、現在国際学術誌に論文投稿しており、査読と改訂を進めている。研究成果(2)では。培養細胞に生理的範囲のずり応力を負荷すると、細胞膜タンパク質が下流方向に集積する濃度勾配形成が誘導されることを明らかにした。さらに、ずり応力による膜分子拡散挙動への影響を明らかにするため、ずり応力負荷下での細胞内蛍光1分子顕微鏡解析を行った。ずり応力負荷下での生細胞を用いた蛍光1分子イメージングはこれまでほとんど報告がなく、本研究で確立した手法は、ずり応力応答に伴う分子動態を最も高精度に定量解析できる画期的な新技術である。蛍光1分子解析の結果、ずり応力下では細胞膜タンパク質の拡散挙動に流れ方向のバイアスが加わることが明らかとなった。これらの研究成果は第74回細胞生物学会大会(2022年6月)等の国内学会で成果発表を行い、また、国際学術誌への投稿論文を準備している。

現在までの達成度 (段落)

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2023 2022 その他

すべて 国際共同研究 (1件) 雑誌論文 (1件) (うち国際共著 1件、 査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (4件) (うち国際学会 1件、 招待講演 3件)

  • [国際共同研究] リーハイ大学(米国)

    • 国名
      米国
    • 外国機関名
      リーハイ大学
  • [雑誌論文] A mechanism with severing near barbed ends and annealing explains structure and dynamics of dendritic actin networks2022

    • 著者名/発表者名
      Holz Danielle、Hall Aaron R、Usukura Eiji、Yamashiro Sawako、Watanabe Naoki、Vavylonis Dimitrios
    • 雑誌名

      eLife

      巻: 11 ページ: e69031

    • DOI

      10.7554/eLife.69031

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [学会発表] Force Transmission via dynamic stretching of Talin as revealed by live-cell single-molecule imaging2023

    • 著者名/発表者名
      Sawako Yamashiro, David M. Rutkowski, Kelli Ann Lynch, Ying Liu, Dimitrios Vavylonis, Naoki Watanabe
    • 学会等名
      American Physical Society March Meeting
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] ずり応力が引き起こす細胞膜分子勾配形成の蛍光1分子イメージング解析2022

    • 著者名/発表者名
      山城佐和子、野村実里、渡邊直樹
    • 学会等名
      第74回日本細胞生物学会大会
  • [学会発表] 細胞内蛍光単分子イメージングによるアクチン線維流動力伝達機構の解明2022

    • 著者名/発表者名
      山城佐和子
    • 学会等名
      第11回分子モーター討論会
    • 招待講演
  • [学会発表] 蛍光単分子イメージングで明らかにする流動力伝達の仕組み2022

    • 著者名/発表者名
      山城佐和子
    • 学会等名
      定量生物学の会 第十回年会
    • 招待講演

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公開日: 2023-12-25  

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