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本研究は、気管組織の輪状軟骨の"パターン"と"形"が何によってどのようにして形成されるのか、そのメカニズムを細胞主体ではなくコラーゲン線維などのECMに着目して明らかにすることを目的としている。産休取得により延長された本年度は、輪状軟骨が周囲の細胞（輪状靭帯細胞や平滑筋細胞）によって形成できるエリアの制限がなされているかの解析と、発生中期におけるコラーゲン線維の形成状態の解析、そして、コラーゲン線維を重合させる酵素類の発現解析を行った。結果、間充織細胞から平滑筋細胞が最初に分化する様子が観察されたことから、背側に軟骨組織が形成されない理由として平滑筋細胞により背側エリアの制限がなされていることがわかった。一方、靭帯細胞と軟骨細胞の分化を解析すると、軟骨細胞への分化が先行して生じている様子や、SHG顕微鏡を用いた観察により、靭帯を形成するコラーゲン線維形成が受精13日目前後ではあまり発達していない様子が観察された。この結果から、輪状軟骨がパターンを生じることに輪状靭帯組織形成の寄与は低いと予想される。合わせて、軟骨組織形成に関わるコラーゲン線維を重合させる酵素の発現パターンは、間充織細胞塊が形成されてから上昇する傾向にあることがわかった。これらの結果をまとめると、パターン形成・形状形成は軟骨細胞自らが発現するコラーゲン線維によってなされる可能性が高いこと、形状形成の一部は平滑筋細胞が担っている可能性が高いことがわかった。
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