公募研究
受精は、配偶子同士の接近・膜の結合および融合・精子核の崩壊など一連の複雑な過程から成り立っている。生物種を超えて、それぞれの過程には配偶子同士を認識するための巧妙な仕組みが数多く備わっており、動植物において近年様々な分子が同定され、その機能が解析されている。しかしながら、精子核崩壊後のプロタミンの解離の過程や、精子核の脱凝縮制御因子など哺乳類においてほとんど解析は進んでいない。そこで本研究では、特に精子-卵膜融合後の認証機構、すなわち卵子細胞質による精子核および精子染色体を認識および制御機構を明らかにする目的で研究を行う。1)精子染色体認識タンパク質の同定精子染色体に含まれるプロタミンを特異的に認識するタンパク質を同定するために、ストレプトアビジン結合ペプチド(SBP)とカルモジュリン結合ペプチド(CBP)と融合したプロタミン(Prm1,Prm2)発現アデノウイルスベクターを作製した、またコントロールとしてHAおよびMycタグ融合Prm1,Prm2発現ベクターを作製し、ウエスタン解析を行った。2)発現および細胞内局在の解析マウス以外の動物種で精子染色体認識に関わるタンパクについて発現解析を行い、NASP, SET, NAP1L1がマウス卵に発現していることを明らかにした。3)受精直後の細胞内局在の変化精子と卵細胞膜の融合後のPrm1,Prm2の局在変化を免疫染色法により調べ、精子融合後の時空間的な制御機構を明らかにした。
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J Innate Immunity
巻: 2 ページ: 607-617
Clinical Immunology
巻: 135 ページ: 459-465
