脳梗塞後の機能回復過程には、梗塞周辺領域をはじめとする残存神経回路の代償過程が関わっている。我々は、運動野脳梗塞モデル動物を用いて、神経回路の脳梗塞急性期から慢性期にかけての機能的変化に着目し、特定の神経回路を制御することで、慢性期における機能回復を促すための手法の開発を目指している。そのために、巧緻動作が要求される梯子走行課題中の、神経活動イメージングを行い、課題遂行中の一次運動野(M1)が、梗塞からの回復過程における変化を観察した。 前年度に構築した蛍光カルシウムイメージングのシステム、および梯子走行課題システムを用いて光血栓性脳梗塞モデル動物の行動計測および運動野を含む周辺領域のカルシウムイメージングを進めた。蛍光カルシウムセンサーであるGCaMP6fを対象領域のM1にアデノ随伴ウイルスベクターを用いて発現させ、1~2か月におよぶ長期間の運動時の活動パターンの変化の有無を調べるためのイメージレジストレーションや蛍光シグナルの観察に影響を及ぼす内因性シグナル等のノイズを補正するといった処理を解析システムに組み込み、観察を行った。また、脳梗塞後の運動機能障害を定量評価するために深層学習モデルを用いて姿勢推定を行い、四肢の関節位置の3次元再構築を行った。M1前肢領域の梗塞により、対側の前肢の落下、および関節の可動域が低下することを確認した。さらに、運動機能障害のみならず認知機能障害についても検討を行った。M1内側に位置する内側無顆粒皮質は、複数の感覚領野と結合関係を持ち、注意に関連する領域であり、この領域を損傷すると半側空間無視様の症状が現れる。この領域内での損傷と回復の関係を調べるため、光梗塞により損傷を作成し、回復過程を調べた。その結果、吻側の内側無顆粒皮質ほど回復の程度が低下する傾向にあることが分かった。
|