公募研究
イヌ腎上皮MDCK細胞の細胞層に変異細胞を出現させるモデルを用い、変異細胞が細胞層の頂端側への排出される(Apical extrusion)に寄与する細胞骨格の再構築制御機構の解明に取り組んだ。これまで、細胞の機械刺激応答に関与し、低分子量G蛋白質RhoAの活性化因子であるRhoGEF, SoloがApical extrusionに必要であることを見出し、さらに、Soloが正常細胞の変異細胞との接着部位に中間径フィラメントであるKeratin 8/18繊維とデスモソームを形成するDesmoglain2を集積させることで関与することを明らかにしていた。本年度は、Soloが働くタイミングと場所を特定するために、Apical extrusion初期のSoloの局在を解析した。その結果、Soloは、正常細胞の細胞間接着部位では細胞密度が高くなるにつれて局在が増加することを見出した。これに対し、正常-変異細胞間では、Soloは存在するがケラチン繊維の集積と相関せず、細胞が排出される過程では局在が減少することが明らかになった。また、Apical extrusion時の変異細胞で発現が増加するEplinと正常細胞側の接着部位に集積するFilaminについても検討し、正常細胞でのSoloの発現抑制はどちらもその増加を抑制した。これらの結果から、Soloは、正常細胞が変異細胞の出現を感知する初期の段階に必要であることが示唆された。また、Soloのプロテオミクス解析から、RhoGEFであるPDZ-RhoGEFとSoloが相互作用することを見出し、さらに、Soloが、自身のGEF活性非依存的にPDZ-RhoGEFを直接活性化することを明らかにした。PDZ-RhoGEFは、細胞間接着部位の力学的な制御に関与することから、Apical extrusionにおいてもこの相互作用が関与することが示唆された。
令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
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すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (6件) (うち国際学会 1件、 招待講演 1件) 備考 (1件)
Molecular Biology of the Cell
巻: 35 ページ: 1-18
10.1091/mbc.E23-05-0154
巻: in press ページ: in press
10.1091/mbc.E23-11-0421
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