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2012 年度 実績報告書

細胞内逆行性輸送における生体膜脂質の機能

公募研究

研究領域細胞内ロジスティクス:病態の理解に向けた細胞内物流システムの融合研究
研究課題/領域番号 23113707
研究機関東京大学

研究代表者

新井 洋由  東京大学, 薬学研究科(研究院), 教授 (40167987)

研究期間 (年度) 2011-04-01 – 2013-03-31
キーワード逆行性物質輸送 / エンドソーム / ホスファチジルセリン / スフィンゴミエリン / リン脂質
研究実績の概要

Evectin-2 は、N 末端側にPHドメイン、C 末端側に膜貫通ドメインを持つリサイクリングエンドソーム(REs)に局在する分子量25kDaのタンパク質である。Evectin-2 を発現抑制するとREsからゴルジ体へのコレラ毒素の輸送が阻害され、またTGN46やGP73 (ゴルジ体に主に局在するが、常にゴルジ体-細胞膜-エンドソームを逆行性物質輸送によって巡回しているタンパク質)がエンドソームに散在化してしまうことから、Evectin-2はREsからゴルジ体への逆行性物質輸送を制御していることが明らかとなった。さらに、Evectin-2のPHドメインがphosphatidylserine (PS)に特異的に結合し、その結合がEvectin-2の機能とREsへの局在に必須であることを示した。Evectin-2に結合するタンパク質を網羅的に解析したところGP73 が同定され、Evectin-2は逆行性物質輸送のカーゴの選別装置として機能していることが示唆された。また、O-phosphoserine (PSの極性頭部分)とEvectin-2のPHドメインの共結晶構造を解くことで、Evectin-2のPHドメインは、phosphoinositidesに結合するPHドメインと異なる構造的特徴を持つことが明らかとなった。
本研究結果は、REsが逆行性物質輸送の重要な中継地点であることをEvectin-2という制御因子を明らかにすることで初めて示した点、REsがcytoplasmic leafletにPSを豊富に発現しているユニークな細胞小器官であることを明らかにした点で意義がある。

現在までの達成度 (段落)

24年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

24年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (13件)

すべて 2013 2012

すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 4件) 学会発表 (9件) (うち招待講演 3件)

  • [雑誌論文] Impaired retrograde membrane traffic through endosomes in a mutant CHO cell defective in phosphatidylserine synthesis2012

    • 著者名/発表者名
      Shoken Lee
    • 雑誌名

      Genes Cells

      巻: 17 ページ: 728-736

    • DOI

      10.1111/j.1365-2443.2012.01622.x

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Subcellular localization of sphingomyelin revealed by two toxin-based probes in mammalian cells2012

    • 著者名/発表者名
      Rieko Yachi
    • 雑誌名

      Genes Cells

      巻: 17 ページ: 720-727

    • DOI

      10.1111/j.1365-2443.2012.01621.x

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Structural basis of the strict phospholipid binding specificity of the pleckstrin homology domain of human evectin-22012

    • 著者名/発表者名
      Seiji Okazaki
    • 雑誌名

      Acta Crystallogr D Biol Crystallogr

      巻: 68 ページ: 117-123

    • DOI

      10.1107/S0907444911051626

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 細胞内ホスファチジルセリン(PS)が制御する膜輸送経路2012

    • 著者名/発表者名
      田口友彦
    • 雑誌名

      生化学

      巻: 84 ページ: 844-848

    • 査読あり
  • [学会発表] evectin-2 PH domainを用いたホスファチジルセリン特異的な新規プローブの開発と応用2013

    • 著者名/発表者名
      松平 竜之
    • 学会等名
      日本薬学会第133年会
    • 発表場所
      横浜
    • 年月日
      2013-03-27 – 2013-03-30
  • [学会発表] 可視化プローブによる細胞内スフィンゴミエリンの局在解析2012

    • 著者名/発表者名
      谷地 理恵子
    • 学会等名
      第85回日本生化学会大会
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      2012-12-14 – 2012-12-16
  • [学会発表] リサイクリングエンドソームから見えてきた細胞内リン脂質の新しい機能2012

    • 著者名/発表者名
      田口 友彦
    • 学会等名
      第85回日本生化学会大会
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      2012-12-14 – 2012-12-16
    • 招待講演
  • [学会発表] evectin-2 PH domainを用いたホスファチジルセリン特異的な新規プローブの開発と応用2012

    • 著者名/発表者名
      松平 竜之
    • 学会等名
      第85回日本生化学会大会
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      2012-12-14 – 2012-12-16
  • [学会発表] Development of probes that visualize phosphatidylserine and sphingomyelin in recycling endosomes2012

    • 著者名/発表者名
      Yasunori Uchida
    • 学会等名
      第35回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      2012-12-11 – 2012-12-14
  • [学会発表] エンドソームを介した膜輸送におけるホスファチジルセリンの機能解析2012

    • 著者名/発表者名
      内田 安則
    • 学会等名
      第54回日本脂質生化学会
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      2012-06-07 – 2012-06-08
  • [学会発表] Equinatoxin-II を用いた細胞内Sphingomyelin の可視化2012

    • 著者名/発表者名
      谷地 理恵子
    • 学会等名
      第54回日本脂質生化学会
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      2012-06-07 – 2012-06-08
  • [学会発表] Intracellular phosphatidylserine is essential for retrograde membrane traffic through endosomes2012

    • 著者名/発表者名
      田口 友彦
    • 学会等名
      第54回日本脂質生化学会
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      2012-06-07 – 2012-06-08
    • 招待講演
  • [学会発表] 細胞内ホスファチジルセリンはリサイクリングエンドソームにおいて逆行性膜輸送を制御する2012

    • 著者名/発表者名
      田口 友彦
    • 学会等名
      日本生化学会東北支部会
    • 発表場所
      山形
    • 年月日
      2012-05-26
    • 招待講演

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公開日: 2018-02-02  

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