公募研究
分裂酵母のRNAi依存性ヘテロクロマチンはヘテロクロマチン領域内で転写されるnon-coding RNA (ncRNA)が引き金となるRNAi機構によって形成される。このRNAi依存的ヘテロクロマチン機構においてはncRNAが転写ごクロマチン上に残ることが予想されているが、その証明はなくメカニズムもさだかでない。このncRNAのクロマチン局在をヒストンを標的にしたRNA免疫沈降法により解析したことろ、たしかにncRNAがクロマチンに結合していることが明らかとなった。さらに、ncRNAは鋳型DNAとDNA-RNAハイブリッドを形成することによりクロマチンに結合し、RNAi因子の足場となることを示した。これは今まで予想されていない新規のメカニズムである。一方、分裂酵母のヘテロクロマチン変異株のスクリーニングをおこない、そのうちのひとつが新規のヘテロクロマチン因子をコードすることを見いだしDsh1と名付けた。Dsh1はncRNAからsiRNAを合成する際、反応の増幅因子として働くRNA依存性RNAポリメラーゼ(RdRP)とそれにより合成された二本鎖RNAからsiRNAを合成するDicerと相互作用し双方の反応を共役させていることがあきらかとなった。またDsh1はヘテロクロマチンに結合することから、RNAi因子によるsiRNA合成反応をクロマチン上で効率良くおこなわせる、ある種のオーガナイザーとして機能するものと考えられる。このような因子の存在は今までになく、今後のヘテロクロマチン形成の全体像を理解する上で新たな視点をあたえる物である。
2: おおむね順調に進展している
DNA-RNAハイブリッド形成の重要性をあきらかにでき、論文として発表することができた。またDsh1についてはRNAi反応系のどの段階で機能するかを明確に示すことができた。
DNA-RNAハイブリッドの形成機構の詳細を明らかにする。またDsh1にかんしては膜貫通ドメイン様の構造をもち核膜内側に局在することから核膜近傍でsiRNA合成場を形成する因子ではないかと考えている。この仮説の検証をおこなう。
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Genes to Cells
巻: 17 ページ: 218-233
10.1111/j.1365-2443.2012.01583.x
Proc.Natl.Acad.Sci.USA
巻: (印刷中)
10.1073/pnas.1116972109
