| 研究概要 |
大脳皮質の抑制性介在ニューロンの多様性は大脳皮質の高度な機能の発現にとって極めて重要と考えられるものの、介在ニューロンによって形成される局所回路は極めて複雑であるため、その機能の全容の解明には至っていない。またその多様性の理解には、その構築プロセス、卸ち発生の解明が重要である。これまでの転写因子発現時期と部位の特異性を利用した研究で、介在ニューロンの誕生部位と時期とがそのサブタイプ決定に重要な要因であることが示されているが、依然として多様性の一部しか説明できていない。その理由の一つとして考えられるのが、標識に利用される転写因子の発現が脳室に接するprogenitorに必ずしも限局されていない事が考えられる。そこで本研究では、特定の発生時期に脳室層に存在するprogenitorから生まれる細胞がニューロンに分化するまでに分裂する回数の違いによって異なる運命を辿るか否かの解明を目指す。また、その結果どのような表現型に違いが生ずるのかを明らかにし、またそのメカニズムの解明を目指す。皮質介在ニューロンの標識は子宮内電気穿孔法で行った。遺伝子導入は大脳皮質介在ニューロンが生まれ始める胎生10.5日目以降におこなった。導入するプラスミドとしては、通常用いられるmcherryなどのプラスミドの他にtransposaseを利用したプラスミドを用いた。具体的にはTol2トランスポゼースをコードするpCAAGGS-T2TP(Kawakami et al., 2004)とpT2K-CAGGS-EGFP(Sato et al, 2007)、即ちTol2 transposon-flanked EGFPとを混合したもの(以下Tol2EGFPと記す)を用いた。その結果、前者では辺縁層と一層にかなり限局されて、また後者の場合、それに加えてより深層にも標識細胞が確認された。
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