肝炎ウイルス感染増殖系を用いた天然物生理活性解析

2013 年度 実績報告書

• 研究領域: 天然物ケミカルバイオロジー：分子標的と活性制御
• 研究課題/領域番号: 24102537
• 研究機関: 国立感染症研究所
• 研究代表者: 渡士 幸一 国立感染症研究所, ウイルス第二部, 主任研究官 (40378948)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2014-03-31
• キーワード: ウイルス / HCV / 抗ウイルス剤 / 天然物 / 複製 / 侵入

研究概要

これまでC型肝炎ウイルス(HCV)産生を抑制する天然化合物を得ている。中でもSF186 (sulochrin)はHCVの細胞への吸着・侵入を阻害すること、SF30 (neoechinulin B)はHCV RNA複製を抑制することが示唆された。まずsulochrinの抗HCV作用の解析をおこなったところ、この化合物はさまざまなHCV遺伝子型の吸着・侵入を広く阻害すること、しかしながらB型肝炎ウイルス感染は阻害しないことが示された。これよりsulochrinはクラスリン依存性エンドサイトーシスを一般的に抑制するわけではないと考えられた。またsulochrinをインターフェロン(IFN)あるいはプロテアーゼ阻害剤と併用した場合は、いずれにおいても相乗的抗HCV作用を示した。また誘導体展開よりsulochrinよりも抗HCV作用の強い化合物を同定した。以上の結果は、sulochrinおよびその誘導体が吸着・侵入を阻害することによって、既存の抗HCV剤との併用でより強い抗HCV作用を示す化合物として有用であることを示唆している。またneoechinulin Bの作用を解析したところ、これはIFN経路とは関係なく抗HCV作用を発揮することが示唆された。一方neoechinulin Bはさまざまな核内ホルモン受容体の中で、HCV RNA複製を活性化することが報告されているliver X receptor (LXR)依存的転写を抑制することが明らかとなった。またLXRの他の阻害剤もHCV RNA複製を抑制したことから、neoechinulin BによるLXR抑制作用が抗HCV作用に関連していることが示唆された。このように今回、neoechinulin BはHCV複製を阻害するとともに、新しい生理活性としてLXR依存的転写を抑制することを明らかにした。

現在までの達成度 (区分)

理由

25年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

25年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Cyclosporin A and its analogs inhibit hepatitis B virus entry into cultured hepatocytes through targeting a membrane transporter NTCP (2014)
  • 著者名/発表者名: Watashi K, Sluder A, Daito T, Matsunaga S, Ryo A, Nagamori S, Iwamoto M, Nakajima S, Tsukuda S, Borroto-Esoda K, Sugiyama M, Tanaka Y, Kanai Y, Kusuhara H, Mizokami M, Wakita T
  • 雑誌名: Hepatology 巻: 59 ページ: 1726-1737
  • DOI: 10.1002/hep.26982
  • 査読あり
• [雑誌論文] NTCP and beyond: opening the door to unveil hepatitis B virus entry (2014)
  • 著者名/発表者名: Watashi K, Urban S, Li W, Wakita T
  • 雑誌名: Int J Mol Sci 巻: 15 ページ: 2892-2905
  • DOI: 10.3390/ijms15022892
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evaluation and identification of hepatitis B virus entry inhibitors using HepG2 cells overexpressing a membrane transporter NTCP (2014)
  • 著者名/発表者名: Iwamoto M, Watashi K, Tsukuda S, Aly HH, Fukasawa M, Fujimoto A, Suzuki R, Aizaki H, Ito T, Koiwai O, Kusuhara H, Wakita T
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 443 ページ: 808-813
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2013.12.052
  • 査読あり
• [雑誌論文] Production of single-round infectious chimeric flaviviruses with DNA-based Japanese encephalitis virus replicon (2014)
  • 著者名/発表者名: Suzuki R, Ishikawa T, Konishi E, Matsuda M, Watashi K, Aizaki H, Takasaki T, Wakita T
  • 雑誌名: J Gen Virol 巻: 95 ページ: 60-65
  • DOI: 10.1099/vir.0.058008-0
  • 査読あり
• [雑誌論文] Total synthesis and anti-hepatitis C virus activity of MA026 (2013)
  • 著者名/発表者名: Shimura S, Ishima M, Nakajima S, Fujii T, Himeno N, Ikeda K, Izaguirre-Carbonell J, Murata H, Takeuchi T, Kamisuki S, Suzuki T, Kuramochi K, Watashi K, Kobayashi S, Sugawara F
  • 雑誌名: J Am Chem Soc 巻: 135 ページ: 18949-18956
  • DOI: 10.1021/ja410145x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Specific inhibition of hepatitis C virus entry into host hepatocytes by fungi-derived sulochrin and its derivatives (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakajima S, Watashi K, Kamisuki S, Tsukuda S, Takemoto K, Matsuda M, Suzuki R, Aizaki H, Sugawara F, Wakita T
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 440 ページ: 515-520
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2013.09.100
  • 査読あり
• [雑誌論文] Interleukin-1 and tumor necrosis factor-α trigger restriction of hepatitis B virus infection via a cytidine deaminase activation-induced cytidine deaminase (AID) (2013)
  • 著者名/発表者名: Watashi K, Liang G, Iwamoto M, Marusawa H, Uchida N, Daito T, Kitamura K, Muramatsu M, Ohashi H, Kiyohara T, Suzuki R, Li J, Tong S, Tanaka Y, Murata K, Aizaki H, Wakita T
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 288 ページ: 31715-31727
  • DOI: 10.1074/jbc.M113.501122
  • 査読あり
• [雑誌論文] Signal peptidase complex subunit 1 participates in the assembly of hepatitis C virus through an interaction with E2 and NS2 (2013)
  • 著者名/発表者名: Suzuki R, Matsuda M, Watashi K, Aizaki H, Matsuura Y, Wakita T, Suzuki T
  • 雑誌名: PLoS Pathog 巻: 9 ページ: e1003589
  • DOI: 10.1371/journal.ppat.1003589
  • 査読あり
• [雑誌論文] Antiviral activity of glycyrrhizin against hepatitis C virus in vitro (2013)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto Y, Matsuura T, Aoyagi H, Matsuda M, Hmwe SS, Date T, Watanabe N, Watashi K, Suzuki R, Ichinose S, Wake K, Suzuki T, Miyamura T, Wakita T, Aizaki H
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8 ページ: e68992
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0068992
  • 査読あり
• [雑誌論文] 薬学的視点からのウイルス学研究―肝炎ウイルス複製阻害化合物の同定とその作用機序 (2013)
  • 著者名/発表者名: 渡士幸一
  • 雑誌名: 薬学雑誌 巻: 133 ページ: 1169-1175
  • 査読あり
• [学会発表] B型肝炎ウイルス感染を抑制するサイトカインの同定とその分子メカニズムの解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 渡士幸一
  • 学会等名: Liver Forum in Kyoto
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 20140329-20140329
  • 招待講演
• [学会発表] プラスミドトランスフェクションによるトランスパッケージング型1回感染性フラビウイルス産生系の確立 (2013)
  • 著者名/発表者名: 鈴木亮介、石川知弘、小西英二、嵯峨涼平、松田麻未、渡士幸一、相崎英樹、高崎智彦、脇田隆字
  • 学会等名: 第36回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131203-20131206
• [学会発表] PhospholipaseA2およびAutophagyによるC型肝炎ウイルス(HCV)分泌過程の制御-グリチルリチンによる抗HCV作用- (2013)
  • 著者名/発表者名: 青柳東代、相崎英樹、松本喜弘、松田麻未、SuSu Hmwe、渡邉則幸、渡士幸一、鈴木亮介、市野瀬志津子、松浦知和、鈴木哲朗、和気健二郎、宮村達男、脇田隆字
  • 学会等名: 第36回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131203-20131206
• [学会発表] シチジンデアミナーゼAID誘導を介した抗B型肝炎ウイルス細胞内免疫応答機構の解明 (2013)
  • 著者名/発表者名: 渡士幸一、Guoxin Liang、岩本将士、丸澤宏之、喜多村晃一、村松正道、鈴木亮介、相崎英樹、脇田隆字
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131110-20131112
• [学会発表] PKR活性化制御を介するシクロフィリン阻害剤の新たな抗C型肝炎ウイルス作用機序 (2013)
  • 著者名/発表者名: 大東卓史、渡士幸一、Ann Sluder、中嶋翔、Katyna Borroto-Esoda、藤田尚志、脇田隆字
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131110-20131112
• [学会発表] C型肝炎ウイルス分泌過程はphospholipase Dが関わる膜輸送により制御される (2013)
  • 著者名/発表者名: 内田奈々子、渡士幸一、中嶋翔、岩本将士、鈴木亮介、相崎英樹、千葉丈、脇田隆字
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131110-20131112
• [学会発表] ヒトNTCP安定発現細胞株におけるB型肝炎ウイルス侵入機構の解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 岩本将士、渡士幸一、九十田千子、アリ フセイン、鈴木亮介、相崎英樹、小祝修、楠原洋之、脇田隆字
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131110-20131112
• [学会発表] B型肝炎ウイルス侵入阻害剤の同定およびそのNTCPを介した感染阻害機構の解明 (2013)
  • 著者名/発表者名: 九十田千子、渡士幸一、岩本将士、鈴木亮介、相崎英樹、小嶋聡一、脇田隆字
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131110-20131112
• [学会発表] Liver X receptor転写活性および感染性C型肝炎ウイルス粒子産生を阻害する天然化合物の同定 (2013)
  • 著者名/発表者名: 中嶋翔、渡士幸一、紙透伸治、竹本健二、鈴木亮介、相崎英樹、菅原二三男、脇田隆字
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131110-20131112
• [学会発表] Study of new virus/host interactions regulating HBV life cycle (2013)
  • 著者名/発表者名: フセイン アリ、渡士幸一、茶山一彰、脇田隆字
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131110-20131112
• [学会発表] 日本脳炎ウイルスレプリコンを用いたトランスパッケージング型1回感染性フラビウイルス粒子産生系の開発 (2013)
  • 著者名/発表者名: 鈴木亮介、石川知弘、小西英二、嵯峨涼平、松田麻未、渡士幸一、相崎英樹、高崎智彦、脇田隆字
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131110-20131112
• [学会発表] C型肝炎ウイルス感染による宿主細胞の脂質代謝変化とHepatic Lipase発現制御 (2013)
  • 著者名/発表者名: 藤本陽、相崎英樹、松田麻未、渡邉則幸、渡士幸一、鈴木亮介、鈴木哲朗、宮村達男、脇田隆字
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131110-20131112
• [学会発表] C型肝炎ウイルスNS5A結合膜タンパク質ELAVL1のウイルス複製・翻訳スイッチング機構の解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 後藤耕司、相崎英樹、渡邉則幸、渡士幸一、鈴木亮介、山越智、四柳宏、森屋恭爾、小池和彦、鈴木哲朗、宮村達男、脇田隆字
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131110-20131112
• [学会発表] 細胞内発現抗体（イントラボディ）によるC型肝炎ウイルスの増殖抑制 (2013)
  • 著者名/発表者名: 松田麻未、斎藤憲司、鈴木亮介、佐藤充、鐘ヶ江裕美、渡士幸一、相崎英樹、千葉丈、斎藤泉、脇田隆字、鈴木哲朗
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131110-20131112
• [学会発表] PhospholipaseA2およびAutophagyによるC型肝炎ウイルス(HCV)分泌過程の制御-グリチルリチンによる抗HCV作用- (2013)
  • 著者名/発表者名: 青柳東代、相崎英樹、松本喜弘、松田麻未、SuSu Hmwe、渡邉則幸、渡士幸一、鈴木亮介、市野瀬志津子、松浦知和、鈴木哲朗、和気健二郎、宮村達男、脇田隆字
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131110-20131112
• [学会発表] 数理モデルによる抗ウイルス薬の薬効評価系の確立 (2013)
  • 著者名/発表者名: 小泉吉輝、岩見真吾、内田奈々子、脇田隆字、渡士幸一
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131110-20131112
• [学会発表] Tetherin/BST-2はHBV複製を負に制御する (2013)
  • 著者名/発表者名: 古賀れい奈、宮川敬、松永智子、渡士幸一、脇田隆字、梁明秀
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131110-20131112
• [学会発表] 新規ピラノンカルボキサミド誘導体の抗HCV効果とその構造活性相関 (2013)
  • 著者名/発表者名: 馬場昌範、外山政明、伊藤渉、岡本実佳、渡士幸一、脇田隆字、Sharon Ashoke
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131110-20131112
• [学会発表] Analysis of bioactivity of fungal-derived natural products based on a virus infection system (2013)
  • 著者名/発表者名: S. Nakajima, K. Watashi
  • 学会等名: The 2nd International Symposium on Chemical Biology of Natural Products
  • 発表場所: Yokohama(Japan)
  • 年月日: 20131028-20131029
• [学会発表] Cyclosporin A and its analogs inhibit hepatitis B virus entry into cultured hepatocytes through targeting sodium taurocholate cotransporting polypeptide (2013)
  • 著者名/発表者名: K. Watashi, A. Sluder, S. Matsunaga, A. Ryo, S. Nakajima, M. Iwamoto, S. Tsukuda, K. Borroto-Esoda, M. Sugiyama, Y. Tanaka, M. Mizokami, T. Wakita
  • 学会等名: 2013 International Meeting on Molecular Biology of Hepatitis B viruses
  • 発表場所: Shanghai(China)
  • 年月日: 20131020-20131023
• [学会発表] Interleukin-1 and tumor necrosis factor-alpha trigger restriction of hepatitis B virus infection via a cytidine deaminase AID (2013)
  • 著者名/発表者名: K. Watashi, G. Liang, M. Iwamoto, H. Marusawa, K. Kitamura, M. Muramatsu, R. Suzuki, J. Li, S. Tong, Y. Tanaka, K. Murata, H. Aizaki, T. Wakita
  • 学会等名: 2013 International Meeting on Molecular Biology of Hepatitis B viruses
  • 発表場所: Shanghai(China)
  • 年月日: 20131020-20131023
• [学会発表] Mechanistic analysis on hepatitis B virus entry in an NTCP-overexpressing cell line (2013)
  • 著者名/発表者名: M. Iwamoto, K. Watashi, S. Tsukuda, H. Aly, R. Suzuki, H. Aizaki, O. Koiwai, H. Kusuhara, T. Wakita
  • 学会等名: 2013 International Meeting on Molecular Biology of Hepatitis B viruses
  • 発表場所: Shanghai(China)
  • 年月日: 20131020-20131023
• [学会発表] A retinoid derivative inhibits hepatitis B virus entry mediated by NTCP (2013)
  • 著者名/発表者名: S. Tsukuda, K. Watashi, M. Iwamoto, R. Suzuki, H. Aizaki, S. Kojima, T. Wakita
  • 学会等名: 2013 International Meeting on Molecular Biology of Hepatitis B viruses
  • 発表場所: Shanghai(China)
  • 年月日: 20131020-20131023
• [学会発表] The discovery of a new virus/host interaction regulating HBV life cycle (2013)
  • 著者名/発表者名: H. Aly, K. Watashi, K. Chayama, T. Wakita
  • 学会等名: 2013 International Meeting on Molecular Biology of Hepatitis B viruses
  • 発表場所: Shanghai(China)
  • 年月日: 20131020-20131023
• [学会発表] Formation of covalently closed circular (ccc)DNA tetracycline inducible HBV expression cell line (2013)
  • 著者名/発表者名: N. Ogura, K. Watashi, T. Wakita
  • 学会等名: 2013 International Meeting on Molecular Biology of Hepatitis B viruses
  • 発表場所: Shanghai(China)
  • 年月日: 20131020-20131023
• [学会発表] Novel regulation mechanism of interferon signaling by cyclophilin through modulation of PKR in HCV-infected cells (2013)
  • 著者名/発表者名: K. Watashi, T. Daito, A. Sluder, K. Borroto-Esoda, T. Wakita
  • 学会等名: 20th International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: Melbourne(Australia)
  • 年月日: 20131006-20131010
• [学会発表] Isolation of a natural product inhibiting the transcriptional activity of liver X receptor and reducing the production of infectious HCV (2013)
  • 著者名/発表者名: S. Nakajima, K. Watashi, S. Kamisuki, K. Takemoto, R. Suzuki, H. Aizaki, F. Sugawara, T. Wakita
  • 学会等名: 20th International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: Melbourne(Australia)
  • 年月日: 20131006-20131010
• [学会発表] Dynamics of the cellular metabolome during hepatitis C virus infection – Regulation of the lipoprotein metabolisms by hepatic lipase - (2013)
  • 著者名/発表者名: A. Fujimoto, H. Aizaki, M. Matsuda, N. Watanabe, K. Watashi, R. Suzuki, T. Suzuki, T. Miyamura, T. Wakita
  • 学会等名: 20th International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: Melbourne(Australia)
  • 年月日: 20131006-20131010
• [学会発表] ウイルス感染系を基盤とした真菌由来天然化合物の生理活性探索 (2013)
  • 著者名/発表者名: 中嶋翔、渡士幸一
  • 学会等名: 天然物ケミカルバイオロジー第4回公開シンポジウム
  • 発表場所: つくば
  • 年月日: 20130528-20130529
• [学会発表] Cyclophilin inhibitors potentiate interferon signaling through diminished PKR phosphorylation in HCV-infected cells (2013)
  • 著者名/発表者名: K. Watashi, T. Daito, A. Sluder, K. Borroto-Esoda, T. Wakita
  • 学会等名: European Association for the Study of the Liver 2013
  • 発表場所: Amsterdam(Netherlands)
  • 年月日: 20130424-20130427
• [学会発表] IL-1- and TNFalpha-triggered intracellular immune response against HBV (2013)
  • 著者名/発表者名: K. Watashi
  • 学会等名: 1st Japan-Taiwan Research Symposium on Hepatitis B virus
  • 発表場所: Tokyo(Japan)
  • 年月日: 20130413-20130414
  • 招待講演
• [図書] 肝疾患Review2014-2015 (2014)
  • 著者名/発表者名: 渡士幸一
  • 総ページ数: 未定
  • 出版者: 日本メディカルセンター
• [図書] エッセンシャルウイルス学 (2014)
  • 著者名/発表者名: 渡士幸一
  • 総ページ数: 未定
  • 出版者: 南江堂