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2013 年度 実績報告書

細胞膜マイクロドメインを足場とする配偶子間認識と膜融合の分子機構

公募研究

研究領域動植物に共通するアロ認証機構の解明
研究課題/領域番号 24112714
研究機関京都産業大学

研究代表者

佐藤 賢一  京都産業大学, 総合生命科学部, 教授 (30235337)

研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2014-03-31
キーワード受精 / シグナル伝達 / 配偶子間相互作用 / 膜マイクロドメイン / アロ認証 / Src / ウロプラキンIII
研究概要

アフリカツメガエル卵細胞の受精成立メカニズムに関する研究をおこない、次の成果を得た。1、未受精卵から単離した膜マイクロドメイン(UF-MDと略す)を用いて、受精に伴う細胞膜シグナル伝達反応(チロシンキナーゼSrcの活性化、膜貫通型タンパク質uroplakin IIIの部分分解とチロシンリン酸化など)の試験管内再構成に成功した。この結果から、精子と単離UF-MDを用いる実験が受精時における精子と卵細胞の相互作用の実態を明らかにするためのモデル実験として利用可能であることが明らかになり、またこのことをふまえて、実際の受精反応の際に卵細胞のMD成分がどのような生理機能を担っているかを解析する動機づけが得られた。2、UF-MDの精子との相互作用および受精成立メカニズムへの貢献能力が卵成熟に伴い構築されることを明らかにした。UF-MDに存在するuroplakin IIIは精子プロテアーゼによる部分分解をうけることで卵細胞内に受精シグナルを送る役割をもっている。この分子の卵細胞形成過程における発現状態を生化学的に調べたところ、卵細胞形成ステージのきわめて早い段階からそのタンパク質発現が見られることがわかった。いっぽうで間接蛍光抗体法により卵細胞表層でのuroplakin IIIの発現を調べたところ、卵成熟過程でuroplakin IIIが卵細胞表層に細胞外ドメインを提示する、すなわち精子との相互作用能を獲得することを示唆する結果を得ることができた。そこで実際に未成熟卵母細胞からMDを単離して(GV-MDと略す)、前記成果1の受精シグナル再構成実験をおこなったところ、UF-MDと異なりGV-MDには精子によるシグナル伝達反応機構が備わっていない、あるいはその活性が極めて低いということが明らかとなった。これらの結果はアフリカツメガエルの受精成立メカニズムにおけるMDとMD局在性分子の生理機能と機能構築に関する新たなかつ重要な知見として、当該研究分野の進展に資するものと考えている。

現在までの達成度 (区分)
理由

25年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

25年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2014 その他

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 備考 (3件)

  • [雑誌論文] The egg membrane microdomain-associated uroplakin III-Src system becomes functional during oocyte maturation and is required for bidirectional gamete signaling at fertilization in Xenopus laevis2014

    • 著者名/発表者名
      Mahbub Hasan AKM, Hashimoto A, Maekawa Y, Matsumoto T, Kushima S, Ijiri TW, Fukami Y, Sato K
    • 雑誌名

      Development

      巻: 141 ページ: 1705-1714

    • DOI

      10.1242/dev.105510

    • 査読あり
  • [備考] 京都産業大学総合生命科学部専任教員紹介ホームページ

    • URL

      http://www.kyoto-su.ac.jp/department/nls/sennin/system/sato.html

  • [備考] 京都産業大学総合生命科学部生命システム学科発生情報学研究室ホームページ(日本語版)

    • URL

      http://www.cc.kyoto-su.ac.jp/~k3884/LABHPJ/index.html

  • [備考] 京都産業大学総合生命科学部生命システム学科発生情報学研究室ホームページ(英語版)

    • URL

      http://www.cc.kyoto-su.ac.jp/~k3884/LABHPE/Welcome.html

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公開日: 2015-05-28  

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